| 人白细胞介素12双亚基共表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 羊东晔,卢放根,汤熙翔,赵水平,吴小平,刘小伟.人白细胞介素12双亚基共表达载体的构建及表达[J].中国免疫学杂志,2004,20(2):79-82. |
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| 作者姓名： | 羊东晔 卢放根 汤熙翔 赵水平 吴小平 刘小伟 |
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| 作者单位： | 湖南长沙中南大学湘雅二医院消化内科和心血管内科,长沙,410011 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (批准号 :3 95 70 3 3 5 )，医学遗传学国家重点实验室开放课题基金资助 |
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| 摘 要： | 目的 :为了基因治疗研究的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基基因共表达质粒 (P( ) IL 12 ) ],比较它与单个亚基基因表达质粒 P( ) P4 0 和P(- ) P35]1∶1共同转染肝癌细胞HepG2后 4 8小时表达结果。方法 :分别克隆hIL 12P4 0 、P35亚基cDNA全长至pcDNA3 1(± )中构建P( ) P4 0 和P(- ) P35,再将两者串联克隆至pcDNA3 1( )中构建P( ) IL 12。脂质体转染 3种质粒至肝癌细胞HepG2 ,4 8小时后抽取细胞总RNA做半定量RT PCR ,同时取细胞上清做ELISA及Western杂交 ,结果进行比较分析。结果 :两种转染方式均可以表达hIL 12蛋白质且半定量RT PCR显示较未转染组hIL 12的mRNA水平均增加 ;转染后 4 8小时P( ) IL 12组细胞培养上清hIL 12表达量较 P( ) P4 0 和P(- ) P35]按 1∶1比例共同转染组显著增高(P <0 0 5 )。结论 :人白细胞介素 12双亚基基因串联共表达质粒 P( ) IL 12 ]能够转入HepG2并表达hIL 12蛋白质 ,并且转染后 4 8小时hIL 12表达量较单个亚基基因表达质粒 P( ) P4 0 、P(- ) P35]1∶1共转染者显著高。
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| 关 键 词： | 人白细胞介素12 真核表达载体pcDNA31(±) HepG2细胞 表达 |
| 文章编号： | 1000-484X(2004)02-0079-04 |
| 修稿时间： | 2002年11月29 |
Construction and expression of human interleukin 12 double-subunit co-expressing vector |
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| YANG Dong-Ye,LU Fang-Gen,Tang Xi-Xiang,ZHAO Shui-Ping,WU Xiao-Ping,LIU Xiao-Wei.Construction and expression of human interleukin 12 double-subunit co-expressing vector[J].Chinese Journal of Immunology,2004,20(2):79-82. |
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| Authors: | YANG Dong-Ye LU Fang-Gen Tang Xi-Xiang ZHAO Shui-Ping WU Xiao-Ping LIU Xiao-Wei |
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| Institution: | YANG Dong-Ye,LU Fang-Gen,Tang Xi-Xiang,ZHAO Shui-Ping,WU Xiao-Ping,LIU Xiao-Wei.Department of Gastroenterology,Xiangya Second Hospital,Central South University,Changsha 410011,Hunan,China |
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| Abstract: | |
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