RNA干扰用于柯萨奇病毒B3感染治疗作用研究 |
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作者姓名: | 陈洁 何嘉莉 陈佳琪 戴玲珊 陈佳玉 |
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作者单位: | [1]台州学院医学院,浙江台州318000 [2]台州市立医院,浙江台州318000 |
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基金项目: | 斟家级大学生创新训练计划项目(No.201310350015);浙江省自然科学基金(No.Y2100248);浙江省科技厅项目(No.2009C33155);浙江省卫生厅项目(No.2009A218);台州市科技局项目(No.102KY15);浙江省中医药管理局项目(No.201IZA113) |
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摘 要: | 目的研究观察自行构建的siRNA表达载体对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染的潜在治疗作用。方法以CVB3聚合酶编码区基因序列为靶点,构建发夹型siRNA真核表达载体pGCsi—U6/GFP/P及与CVB基因组序列无关的阴性对照pGCsi—U6/GFP/N。利用脂质体转染进入Hela细胞后,用CVB3毒株进行攻击,观察感染后Hela细胞病变情况,并用RT—PCR法检测细胞培养上清中的CVB3负链RNA水平。结果构建的表达质粒pGCsi—U6/GFP/P在Hela细胞能够正确表达,其表达产物能够使CVB3基因沉默,并间接抑制了CVB3的复制。结论本实验成功构建了能够抑制CVB3的发夹状siRNA表达质粒,该质粒具有增强细胞抗CVB3感染的能力。
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关 键 词: | 柯萨奇病毒B3 Hela细胞 RNA干扰 |
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