| HSV-TK与IL-2共表达真核载体的构建及 其在A549细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 宋青凤,方慧娟,熊维宁,徐永健,熊盛道,曹勇. HSV-TK与IL-2共表达真核载体的构建及 其在A549细胞中的表达[J]. 肿瘤防治研究, 2009, 36(3): 194-197. DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2009.03.007 |
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| 作者姓名： | 宋青凤 方慧娟 熊维宁 徐永健 熊盛道 曹勇 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030 |
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| 摘 要： | ![]()
目的构建含有自杀基因单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和人类细胞因子白细胞介素-2(IL-2)的联合表达质粒载体并观察其在人类肺腺癌细胞系A549细胞中的表达。方法设计、合成多克隆位点（MCS）插入到质粒pSNAV中,然后分别从其他不同的质粒剪切片段HSV-TK、内部核糖体进入位点(IRES)、IL-2并依次接入到MCS中，最终得到目的质粒pSNAV-TK-IRES-IL2(pMTⅡ)。目的质粒经酶切、DNA测序鉴定正确后，转染到A549细胞中。用RT-PCR方法、ELISA法检测转染后细胞目的基因的转录和表达；进一步倒置显微镜观察、MTT法检测更昔洛(GCV)对转然后细胞的杀伤作用。结果经酶切、DNA测序、RT-PCR法和ELISA法鉴定，双基因真核表达载体pMTⅡ序列正确并能有效表达。进一步倒置显微镜观察和MTT法检测表明HSV-TK/GCV自杀基因系统对A549细胞有明显的杀伤作用。结论成功构建了pMTⅡ真核表达载体，并观察了其对A549细胞的杀伤效应，为进一步研究HSV-TK/GCV联合IL-2基因治疗肺癌提供实验基础。
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| 关 键 词： | 肺癌 基因治疗 单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV-TK) IL-2 |
| 收稿时间： | 2008-04-07 |
| 修稿时间： | 2008-06-06 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector Containing HSV-TK and IL-2 Double Genes and Its Expression in Human Pulmonary Adenocarcinoma Cell A549 |
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| SONG Qing-feng,FANG Hui-juan,XIONG Wei-ning,XU Yong-jian,XIONG Sheng-dao,CAO Yong. Construction of Eukaryotic Expression Vector Containing HSV-TK and IL-2 Double Genes and Its Expression in Human Pulmonary Adenocarcinoma Cell A549[J]. Cancer Research on Prevention and Treatment, 2009, 36(3): 194-197. DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2009.03.007 |
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| Authors: | SONG Qing-feng FANG Hui-juan XIONG Wei-ning XU Yong-jian XIONG Sheng-dao CAO Yong |
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| Affiliation: | Department of Respiratory Medicine, Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | IL-2 |
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