| 人胰腺星状细胞分离方法改良 |
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| 引用本文： | 田 蕾,陆子鹏,吴鹏飞,蔡宝宝,赵良涛,钱 栋,徐庆成,朱 毅,张静静,杜 青,蒋奎荣,吴峻立,苗 毅. 人胰腺星状细胞分离方法改良[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2015, 0(5): 595-599 |
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| 作者姓名： | 田 蕾 陆子鹏 吴鹏飞 蔡宝宝 赵良涛 钱 栋 徐庆成 朱 毅 张静静 杜 青 蒋奎荣 吴峻立 苗 毅 |
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| 作者单位： | 南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029,南京医科大学胰腺研究所,南京医科大学第一附属医院胰腺中心,普外科实验室,江苏 南京 210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(81272239);国家自然科学基金青年基金(81300351) |
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| 摘 要： | ![]()
目的:探讨人胰腺星状细胞的两种新分离方法?方法:通过酶消化-密度梯度离心法进行静止态的人正常胰腺星状细胞的分离,分离获得的细胞在含10%FBS的DMEM/F12继续培养?通过组织块外植法获得激活态的人肿瘤相关胰腺星状细胞(CaPSCs),分离获得的细胞在含20%FBS的DMEM/F12继续培养?结果:通过方法改良,1 g人正常胰腺组织能够获得(0.5~5.0)×106个星状细胞,细胞活率约为90%?使用新的组织块外植法后,组织块不易掉落,细胞爬出时间显著缩短,约5~10 d即可获得CaPSCs?所有细胞贴壁良好,细胞倍增时间约为24 h?正常胰腺星状细胞(normal pancreatic stellate cells,NPSCs)培养早期形态符合典型静止态星状细胞特征,细胞为多边形或圆形,内含丰富脂滴,在荧光显微镜下可观察到320 nm激发波长下的蓝绿色自发荧光?NPSCs培养晚期和CaPSCs呈多触角状,胞内无脂滴,细胞增殖速度明显快于静止态细胞?激活态的细胞均表达α-SMA?Desmin?vimentin?GFAP等胰腺星状细胞特征性标记?结论:新的原代培养方法能够满足静止态和激活态两种状态胰腺星状细胞的分离培养,同时能够增加细胞得率?缩短分离培养时间,所获得细胞的活性和纯度符合进一步实验的要求,为胰腺星状细胞的相关研究提供了便利?
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| 关 键 词： | 胰腺星状细胞 分离方法 改良 |
| 收稿时间： | 2015-02-27 |
Improvement of a in isolation method for pancreatic stellate cells from human pancreas |
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| Tian Lei,Lu Zipeng,Wu Pengfei,Cai Baobao,Zhao Liangtao,Qian Dong,Xu Qingcheng,Zhu Yi,Zhang Jingjing,Du Qing,Jiang Kuirong,Wu Junli and Miao Yi. Improvement of a in isolation method for pancreatic stellate cells from human pancreas[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2015, 0(5): 595-599 |
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| Authors: | Tian Lei Lu Zipeng Wu Pengfei Cai Baobao Zhao Liangtao Qian Dong Xu Qingcheng Zhu Yi Zhang Jingjing Du Qing Jiang Kuirong Wu Junli Miao Yi |
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| Affiliation: | Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China,Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China and Pancreas Institute of NJMU,Pancreas Center,Lab for Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | pancreatic stellate cells isolation method modification |
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