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RNA干扰沉默MKK7对SH-SY5Y细胞凋亡的影响
引用本文:赖露颖,张庆国,李 乐,赵 伟,雷洪伊,姜 珊,张 婧,徐世元.RNA干扰沉默MKK7对SH-SY5Y细胞凋亡的影响[J].南京医科大学学报,2015(5):656-651.
作者姓名:赖露颖  张庆国  李 乐  赵 伟  雷洪伊  姜 珊  张 婧  徐世元
作者单位:南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282,南方医科大学珠江医院麻醉科,广东 广州 510282
基金项目:国家自然科学基金资助(81271390)
摘    要:目的:探讨RNA干扰沉默丝裂原激活的蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MKK7)基因对SH-SY5Y细胞凋亡的影响?方法:设计并合成针对MKK7的小干扰RNA (small interference RNA,siRNA)3条(MKK7siRNA-1?MKK7siRNA-2?MKK7siRNA-3)及与MKK7基因无同源性的带有红色荧光的阴性对照siRNA(negative control siRNA),在lipofectamine 2000介导下转染SH-SY5Y细胞,荧光显微镜下观察转染效果,RT-PCR观察MKK7 mRNA表达及Western blot 检测MKK7蛋白的表达,进而筛选出转染效果好的MKK7siRNA,CCK-8检测各组细胞活力,Hochest 33258检测各组细胞凋亡染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测p-JNK?凋亡蛋白cleaved caspase-3的变化?结果:① MKK7siRNA-3组的MKK7 mRNA表达最低,MKK7蛋白表达最低;②与空白对照组(control group)比较,MKK7siRNA-3组的细胞活力无统计学差异,p-JNK?cleaved caspase-3水平降低,凋亡率降低?结论:RNA干扰沉默MKK7可通过下调JNK磷酸化进而抑制SH-SY5Y细胞的凋亡?

关 键 词:SH-SY5Y细胞    RNA干扰  MKK7  凋亡
收稿时间:2014/9/27 0:00:00

Effects of the RNA interference silenceing MKK7 on SH-SY5Y cells apoptosis
Lai Luying,Zhang Qingguo,Li Le,Zhao Wei,Lei Hongyi,Jiang Shan,Zhang Jing and Xu Shiyuan.Effects of the RNA interference silenceing MKK7 on SH-SY5Y cells apoptosis[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2015(5):656-651.
Authors:Lai Luying  Zhang Qingguo  Li Le  Zhao Wei  Lei Hongyi  Jiang Shan  Zhang Jing and Xu Shiyuan
Institution:Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China,Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China,Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China,Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China,Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China,Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China,Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China and Department of Anesthesiology,Zhujiang Hospital,Southern Medical University, Guangzhou 510282,China
Abstract:
Keywords:SH-SY5Y cells  RNA interference  MKK7  screening  apoptosis
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