CVB3心肌炎CTL亚类TCR Vβ基因取用格局分析

目的探讨柯萨奇病毒（CVB3）心肌炎细胞毒T细胞（CTL）亚类（ACTL、VCTL、MCTL）TCR CDR3 Vβ基因取用格局。方法无菌摘取72h内新生Balb／c鼠心脏，培养单层心肌细胞并将其分为三组，分别用CVB3、放线菌素D处理和不经过任何处理；实验组制备CVB3心肌炎鼠模型，处死后将其肠系膜淋巴结制成单细胞悬液，分别加入上述三组单层心肌细胞，采用免疫吸附法获取ACTL、VCTL、MCTL，对照组鼠为正常小鼠处死后取肠系膜淋巴结制成单细胞悬液；采用MTT法对实验组ACTL、VCTL、MCTL和对照组T细胞进行细胞毒鉴定；常规进行RT-PCR，判断实验组细胞及对照组细胞的TCR Vβ基因取用格局。结果对照组T细胞表达Vβ基因全部20个家族，而实验组三类CTL的Vβ基因取用格局呈现明显的限制性，ACTL优势表达Vβ36、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3，MCTL优势表达Vβ5．1、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3，而VCTL优势表达Vβ7、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3。结论CVB3心肌炎中导致心肌细胞损伤的CTL受到特异性抗原刺激后其TCR Vβ基因取用格局呈现明显的限制性。