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基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin的构建及体外研究
引用本文:聂明明,方国恩,王星华,苏长青,崔贞福,李林芳,钱其军. 基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin的构建及体外研究[J]. 中华实验外科杂志, 2006, 23(1): 45-48
作者姓名:聂明明  方国恩  王星华  苏长青  崔贞福  李林芳  钱其军
作者单位:1. 200433,上海,第二军医大学附属长海医院普外科
2. 第二军医大学附属东方肝胆外科医院病毒和基因治疗实验室
基金项目:国家“863”高技术研究发展计划资助项目(2001AA217031)
摘    要:
目的构建一种新型的肿瘤基因.病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin(CNHK300-mE),以肿瘤增殖病毒为载体,携带抗肿瘤新生血管生成的基因。方法利用基因重组技术将人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子插入腺病毒E1A基因上游,将小鼠内皮抑素基因表达盒插入到腺病毒包装信号和hTERT启动子之间,通过病毒增殖试验、电镜技术、Western blot分析、酶联免疫吸附实验(ELISA)、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验,观察CNHK300-mE的复制情况、mE的表达情况及对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的抑制情况。结果成功构建了基因-病毒治疗系统CNHK300-mE,该系统为hTERT启动子调控腺病毒E1A基因表达并携带小鼠内皮抑素基因的重组腺病毒。该病毒可以在端粒酶阳性的胃癌细胞株SGC-7901和肝癌细胞株HepGⅡ中大量增殖及复制,而在端粒酶阴性的正常纤维细胞中不增殖。电镜证实该重组病毒在胃癌细胞株SGC-7901中复制及增殖。ELISA检测表明SGC-7901感染CNHK300-mE后7d,小鼠内皮抑素的表达量为1000μg/L。CAM实验证实该病毒感染胃癌细胞后的培养液上清具有抗新生血管生成的生物活性。结论基因-病毒治疗系统CNHK300-mE能在端粒酶阳性的肿瘤细胞中特异性增殖复制,并大量表达具有抗新生血管生成生物活性的小鼠内皮抑素。

关 键 词:基因-病毒治疗系统 CNHK300-murine endostatin 肿瘤基因 血管生成 端粒酶 肿瘤细胞
收稿时间:2005-06-06
修稿时间:2005-06-06

Development of gene-viral therapeutic system CNHK300-mE and its primary study in vitro
NIE Ming-ming, FANG Guo-en, WANG Xing-hua,et al.. Development of gene-viral therapeutic system CNHK300-mE and its primary study in vitro[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2006, 23(1): 45-48
Authors:NIE Ming-ming   FANG Guo-en   WANG Xing-hua  et al.
Affiliation:NIE Ming-ming, FANG Guo-en, WANG Xing-hua, et al.
Abstract:
Keywords:Gene therapy   Virus   Tumor   Telomerase   Endostatin
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