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人诱骗受体3酶联免疫定量检测方法的建立
引用本文:伍兵,陈纬,王锃,陈龙,陈锦容,吴海平,吴尚毅,汪宽福,张美,张震寰,张鲁榕,张亨山,林建华. 人诱骗受体3酶联免疫定量检测方法的建立[J]. 临床检验杂志, 2018, 0(1): 5-8
作者姓名:伍兵  陈纬  王锃  陈龙  陈锦容  吴海平  吴尚毅  汪宽福  张美  张震寰  张鲁榕  张亨山  林建华
作者单位:福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005,厦门市鲎试剂生物科技股份有限公司,福建厦门361022,厦门市鲎试剂生物科技股份有限公司,福建厦门361022,厦门市鲎试剂生物科技股份有限公司,福建厦门361022,佛罗里达大学医学院放疗科,美国佛罗里达州盖恩斯维尔 32610,佛罗里达大学医学院放疗科,美国佛罗里达州盖恩斯维尔 32610,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005/佛罗里达大学医学院放疗科,美国佛罗里达州盖恩斯维尔 32610,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005,福建省肿瘤个体化主动免疫治疗重点实验室及福建省放射生物高校重点实验室,福建医科大学附属第一医院,福州 350005
基金项目:国家科技部国际合作项目(2015DFA31770);福建省发改委重点项目(FGW2014);福建省科技厅产学研项目(2014Y4002)。
摘    要:
目的建立检测人诱骗受体3(DcR3)含量的ELISA方法。方法建立固相双抗体夹心法定量检测DcR3:用抗DcR3抗体包被ELISA板,捕捉样本中DcR3,再加入生物素标记的抗DcR3抗体及亲合素标记的辣根过氧化物酶,形成含酶的固相复合物,最后以底物显色,以同板上的标准曲线定量。对所建立的方法进行灵敏度、特异性、精密度、回收率、线性范围及血浆DcR3参考范围的评估。结果所建立方法分析灵敏度为0.051 ng/m L,重复性和期间精密度分别小于10%和15%,平均回收率为90.50%。在包被抗体中加入2倍量抗TNF-α、在检测抗体中加入10倍量生物素标记的抗LIGHT、抗FAS或抗TNF-α或在DcR3标准品中加入10倍量的LIGHT纯蛋白,均不影响标准曲线的状态。检测方法的线性范围为0.25~16 ng/m L(r≥0.98)。128例正常成人血浆DcR3的均值为(0.21±0.05)ng/m L,95%可信限参考值范围为0.14~0.28 ng/m L,无年龄及性别差异。结论所建立的ELISA检测方法具有特异性高、灵敏度、精密度及线性好、可测范围大等特点,可用于检测人血DcR3含量。

关 键 词:人诱骗受体3;酶联免疫吸附试验;血浆;正常值
收稿时间:2017-11-18

Establishment of quantificative ELISA for determination of human decoy receptor 3
Abstract:
Keywords:decoy receptor 3   enzyme linked immunosorbent assay   plasma   normal value
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