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小鼠天然CD4^+CD25^+调节性T细胞表达α7烟碱型乙酰胆碱受体
作者姓名:王大伟  周荣斌  姚咏明
作者单位:[1]北京军区总医院急诊科,北京100700 [2]山西医科大学第二临床医学院急诊科,太原030001 [3]解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所 ,北京100048
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.30872683,30971192);国家重点基础研究发展规划项目(No.2005CB522602)
摘    要:
目的探讨C57BL/6J小鼠的天然CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)是否存在α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)。方法使用小鼠调节性T细胞试剂盒分离小鼠脾脏CD4^+CD25^+Treg,流式细胞术鉴定CD4^+CD25^+Treg的纯度。分别采用免疫荧光染色、共聚焦显微镜、Western印迹和逆转录聚合酶链反应检测Treg表面α7nAchR蛋白/基凶表达:结果α-银环蛇毒素-FITC染色、流式检测显示Treg细胞表面结合α-银环蛇毒素-FITC;共聚焦显微镜成像观察到Treg细胞表面结合大量α-银环蛇毒索;Western印迹检测证实Treg细胞样本中检测到了清楚的α7nAchR条带,分子量大小约为55kD;RT-PCR分析发现Treg细胞样本中检测到了199bp大小的特异性α7nAchR目的基因条带。结论小鼠天然CD4^+CD25^+Treg细胞表达α7nAChR。

关 键 词:调节性T细胞  α7烟碱型乙酰胆碱受体  免疫性  小鼠
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