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铁皮石斛倍半萜合成酶基因的克隆与表达分析
作者姓名:沈王琴  陈龙龙  张传明  林毅  蔡永萍  樊洪泓
作者单位:安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036,安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036,安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036,安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036,安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036,安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036
基金项目:安徽省教育厅自然科学重点项目(KJ2015A005);安徽省大学生创新创业训练计划项目(201610364059)
摘    要:目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale倍半萜合成酶(sesquiterpene synthase,SES)基因,分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及在信号分子茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)诱导下的表达模式。方法采用RACE技术克隆铁皮石斛SES(DoSES)cDNA全长,利用相关软件和在线网站对其进行生物信息学分析,并使用实时荧光定量PCR技术分析DoSES的表达模式。结果获得的DoSES cDNA序列(Gen Bank登录号为KX278311)全长1 890 bp,含有1个1 659 bp的完整开放阅读框(ORF),编码552个氨基酸的多肽链,与其他科属植物的同源性达到60%左右。DoSES基因在铁皮石斛茎中表达量最高,从高到低依次是叶、花、原球茎、根;且受到Me JA的诱导。结论克隆了铁皮石斛DoSES基因,为进一步研究调控铁皮石斛萜类代谢奠定了理论基础。

关 键 词:铁皮石斛  倍半萜合成酶  基因克隆  RACE技术  表达分析
收稿时间:2017-05-08
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