| 小鼠IL-18真核表达质粒的构建及其生物学活性的鉴定 |
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| 引用本文： | 贾静,李虹,李明远,吕梅励,杨志惠,陈文捷,贾怡,蒋中华,张林. 小鼠IL-18真核表达质粒的构建及其生物学活性的鉴定[J]. 华西药学杂志, 2005, 20(6): 476-479 |
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| 作者姓名： | 贾静 李虹 李明远 吕梅励 杨志惠 陈文捷 贾怡 蒋中华 张林 |
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| 作者单位： | 四川大学华西人类疾病生物治疗教育部重点实验室,四川,成都,610041;四川大学基础医学与法医学院微生物实验室,四川,成都,610041 |
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| 摘 要： | ![]()
目的构建小鼠白细胞介素18(interleukin18,IL-18)的真核表达质粒,并检测其表达的IL-18的生物学活性。方法采用RT-PCR获得小鼠IL-18基因,通过EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及连接反应,构建pEGFP-mIL-18真核表达载体,重组载体经过限制性内切酶、PCR及DNA序列测定等证实连接片段的正确性后,转染HEK293细胞系,荧光显微镜观察GFP-mIL-18融合蛋白的表达,收集转染后72h的上清液,MTT法检测上清液中IL-18表达产物的生物学活性。结果酶切分析、PCR鉴定、DNA测序表明成功地构建了pEGFP-mIL-18真核表达载体,MTT法证明表达产物有刺激小鼠脾细胞增殖的功能。结论所获pEGFP-mIL-18真核表达载体能在体外表达具有生物学活性的IL-18,为进一步研究IL-18的功能和运用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 白细胞介素18 融合蛋白 真核表达 生物活性 |
| 文章编号： | 1006-0103(2005)06-0476-04 |
| 收稿时间： | 2005-05-01 |
| 修稿时间： | 2005-05-01 |
Construction of eukaryotic expression vector containing mouse IL-18 and examination of the bioactivity of the expressed IL-18 |
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| JIA Jing,LI hong,LI Ming-yuan,L Li-mei,YANG Zhi-hui,CHEN Wen-jie,JIA Yi,JIANG Zhong-hua,ZHANG Lin. Construction of eukaryotic expression vector containing mouse IL-18 and examination of the bioactivity of the expressed IL-18[J]. West China Journal of Pharmaceutical Sciences, 2005, 20(6): 476-479 |
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| Authors: | JIA Jing LI hong LI Ming-yuan L Li-mei YANG Zhi-hui CHEN Wen-jie JIA Yi JIANG Zhong-hua ZHANG Lin |
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| Affiliation: | 1. Key Laboratory of Biotherapy of Human Diseases, Ministry of Education, Sichuan University, Chengdu 610041, China ;2. Department of Microbiology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University, Chengdu 610041, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Interleukin 18 Recombined protein Eukaryotic expression Bioactivity |
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