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| RGD-TAT-KDRsiRNA慢病毒载体构建及抗肿瘤活性 | |
| 引用本文： | 张俭丽,郑旭,王杰.RGD-TAT-KDRsiRNA慢病毒载体构建及抗肿瘤活性[J].中国公共卫生,2015,31(5). |
| 作者姓名： | 张俭丽 郑旭 王杰 |
| 作者单位： | 1. 沈阳医学院附属卫生学校基础护理教研室,辽宁沈阳,110034 2. 沈阳市和平区疾病预防控制中心 3. 沈阳医学院继续教育学院 |
| 摘 要： | 目的 构建精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)介导的穿膜肽(TAT)-血管内皮细胞生长因子受体(KDR) siRNA融合基因慢病毒载体,探讨其对人肺癌A549细胞的抑制效果.方法 设计合成编码RGD的2条寡核苷酸链,克隆到pGC/TAT-KDR siRNA载体的TAT下游,构建TAT-RGD-KDR siRNA融合基因载体;慢病毒包装并感染A549细胞;通过Western blot和real-time PCR检测A549细胞KDR基因表达水平;通过噻唑蓝法、双色法流式细胞仪和Transwell侵袭实验检测KDR基因沉默对A549细胞凋亡和侵袭力的影响.结果 测序和Blast比对证实重组载体中的RGD序列与设计一致;TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染A540细胞KDRmRNA和蛋白表达水平分别为(22.7±3.9)％和(19.3±2.7)％,明显低于TAT-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染组,差异有统计学意义(P＜0.01);该载体具有较强的抑制A549细胞增殖、促进细胞凋亡和抑制细胞体外侵袭力的作用.结论 TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体通过抑制细胞KDR mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和侵袭、促进细胞凋亡. |
| 关 键 词： | 精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD) 穿膜肽(TAT) 血管内皮细胞生长因子受体(KDR) TAT-RGD-KDR siRNA融合基因 慢病毒载体 |
Lentiviral vector construction of RGD-TAT-KDR siRNA fusion gene and assessment of its antitumor activity |
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| ZHANG Jian-li,ZHENG Xu,WANG Jie.Lentiviral vector construction of RGD-TAT-KDR siRNA fusion gene and assessment of its antitumor activity[J].Chinese Journal of Public Health,2015,31(5). | |
| Authors: | ZHANG Jian-li ZHENG Xu WANG Jie |
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| Keywords: | |