莲心碱体外吸收对Ang Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表型转化的影响 |
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引用本文: | 贾沛芝,林珊,曾建伟,熊晓满,刘菲,王美玲,林炜,陈达鑫.莲心碱体外吸收对Ang Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表型转化的影响[J].福建中医药,2022(5):20-23. |
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作者姓名: | 贾沛芝 林珊 曾建伟 熊晓满 刘菲 王美玲 林炜 陈达鑫 |
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作者单位: | 1. 福建中医药大学中西医结合研究院;2. 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年科学基金项目(82004126);;福建省科技厅重大专项(2019YZ014004);;福建省自然科学基金项目(2021J01942); |
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摘 要: | 目的 通过检测血管平滑肌A7R5细胞内莲心碱的含量,同时测定不同浓度莲心碱对A7R5细胞活力的影响及莲心碱的药效作用,探究莲心碱进入细胞作用的效率与对A7R5细胞表型转换的影响。方法 体外培育大鼠血管平滑肌细胞A7R5细胞株,将其随机分为6组,分别用不同剂量莲心碱干预(0、5、25、50、100、200μg/mL),采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)检测不同浓度的莲心碱干预15 min时A7R5细胞质中莲心碱浓度;采用MTT法筛选莲心碱药物浓度后,选择对细胞无伤害的药物浓度,采用血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导建立A7R5细胞表型转换模型,将其分为空白对照组(完全培养基)、Ang Ⅱ组(1×10-6 mol/L Ang Ⅱ)、莲心碱组(1×10-6 mol/L Ang Ⅱ+10μg/mL莲心碱),干预24 h后,双转盘活细胞共聚焦实时成像分析系统观察A7R5细胞中表型转换标志物α-SMA的蛋白表达情况。结果 通过液质联用可检测到破碎细胞中莲心碱的含量,与干预浓度呈剂量依赖,空白对照和末次清洗细胞的PBS中未检...
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关 键 词: | 莲心碱 血管平滑肌细胞 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱 表型转化 |
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