Survivin-shRNA 对A431 皮肤鳞状细胞癌 抑制作用的实验研究

目的 观察Survivin-shRNA 对A431 皮肤鳞状细胞癌的作用效果，探讨核因子κB（NF-κB）在 Survivin-shRNA 对皮肤鳞状细胞癌（SCC）抑制作用中的分子生物学机制。方法 构建Survivin-shRNA 腺病 毒载体，筛选最佳干扰序列。将培养好的A431 细胞混悬液皮下接种于裸鼠，复制A431 裸鼠移植瘤模型，随机 分为空白对照组、阴性对照组、Survivin-shRNA 转染组和Res 阳性对照组，每组5 只，瘤内注射相应试剂，第 20 天处死所有裸鼠，取瘤组织分别测量瘤体积、瘤重，绘制肿瘤生长曲线，计算抑瘤率；HE 染色观察细胞形 态；TUNEL 检测细胞凋亡情况；Western blot 法测定Survivin、IκB、P65、P53、Caspase-3 蛋白的表达。结果 Survivin-shRNA 转染组或Res 阳性对照组的裸鼠移植瘤，瘤体积及瘤重降低，与空白对照组及阴性对照组比 较差异有统计学意义（P <0.05）；TUNEL 检测结果示Survivin-shRNA 转染组、Res 阳性对照组的裸鼠移植瘤， 细胞凋亡率增高，与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义（P <0.05）；Survivin-shRNA 转染组及 Res 阳性对照组可见肿瘤细胞较少，分布稀疏，有变性的液化坏死灶，癌细胞皱缩变圆，胞核固缩；SurvivinshRNA 转染组或Res 阳性对照组裸鼠移植瘤，Survivin、P65 蛋白的表达均降低，与空白组对照组及阴性对照组 比较，差异有统计学意义（P <0.05），IκB、P53、Caspase-3 蛋白表达增高，与空白对照组及阴性对照组比较， 差异有统计学意义（P <0.05）。结论 Survivin-shRNA 可以抑制皮肤鳞状细胞癌裸鼠移植瘤的生长，其机制 之一可能是通过抑制NF-κB 信号通路，活化抑癌基因P 53，进而促进肿瘤细胞凋亡，抑制SCC 移植瘤的生长。

Inhibitory effect of survivin-shRNA on A431 skin squamous cell carcinoma