| 小鼠γ—干扰素真核表达质粒的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 胡晓文 李建国. 小鼠γ—干扰素真核表达质粒的构建和鉴定[J]. 现代临床医学生物工程学杂志, 2003, 9(6): 482-483,485 |
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| 作者姓名： | 胡晓文 李建国 |
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| 作者单位： | 中山大学附属第二医院呼吸内科 广州510120(胡晓文)，中山大学附属第二医院呼吸内科 广州510120(李建国) |
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| 摘 要： | 目的 克隆小鼠γ-干扰素(γ-IFN)基因，构建并鉴定小鼠γ-干扰素真核表达质粒。方法 从BALB／c小鼠脾脏提取总RNA，用RT—PCR方法扩增出小鼠γ-干扰素基因，分别用EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切扩增片段和pcDNA3.1(-)，定向克隆到真核表达质粒pcDNA3．1(-)，构建成真核表达质粒pcDNA3．1(-)γ-IFN，转化产物通过PCR扩增筛选，双酶切鉴定；阳性克隆进行序列分析。结果 RT—PCR产物电泳可见一约500bp大小目的片段，PCR和双酶切电泳结果均证实已插入约500bp的γ-IFN基因片段；阳性克隆测序结果表明克隆的小鼠γ-干扰素基因完全正确。结论 成功构建了小鼠γ-干扰素真核表达质粒，为进一步气道内实施哮喘小鼠基因治疗打下了坚实基础。
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| 关 键 词： | 小鼠 γ—干扰素 真核表达质粒 构建 鉴定 定向克隆 序列分析 |
| 文章编号： | 1008-634X(2003)06-0482-03 |
Construction and Identification of Mouse Gamma Interferon Gene Eukarotic Expressing Plasmid |
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| HU Xiao-wen,LI Jian-guo. Construction and Identification of Mouse Gamma Interferon Gene Eukarotic Expressing Plasmid[J]. Journal of Modern Clinical Medical Bioengineering, 2003, 9(6): 482-483,485 |
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| Authors: | HU Xiao-wen LI Jian-guo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gamma interferon direct clone Eukarotic expressing plasmid Sequence analysis |
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