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| 超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素基因B的原核表达 | |
| 引用本文： | 王丽婵,张庶民,余模松,杨晓明. 超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素基因B的原核表达[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2006, 26(5): 418-421 |
| 作者姓名： | 王丽婵 张庶民 余模松 杨晓明 |
| 作者单位： | 1. 100050,北京,中国药品生物制品检定所血清室;武汉生物制品研究所 2. 100050,北京,中国药品生物制品检定所血清室 3. 武汉生物制品研究所 |
| 摘 要： | 目的构建重组pET-30a-SEB原核表达载体,转化感受态大肠杆菌BL-21(DE3),诱导表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcalenterotoxinB,SEB)。方法利用PCR技术从产SEB的金黄色葡萄球菌标准菌株CMCC-26075基因组DNA中克隆SEB全长序列,将其克隆到pGEM-TEasy载体中并进行测序。构建pET-30a-SEB原核表达质粒,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代β-D半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,经镍离子螯合亲和层析纯化后免疫鉴定。结果PCR获得超抗原SEB基因片段,与克隆载体连接后经测序与文献报道的基本一致;成功构建了pET-30a-SEB原核表达质粒且成功诱导表达出相对分子质量(Mr)约31×103的蛋白。结论成功克隆了seb基因序列,并进行了原核表达和鉴定,获得了SEB蛋白,为后续对超抗原SEB的进一步研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌肠毒素B 超抗原 基因克隆 原核表达 PCR免疫印迹 |
| 修稿时间： | 2005-05-30 |
Prokaryotic expression of superantigen staphylococcal enterotoxin B |
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| WANG Li-chan,ZHANG Shu-min,YU Mo-song,YANG Xiao-ming. Prokaryotic expression of superantigen staphylococcal enterotoxin B[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2006, 26(5): 418-421 | |
| Authors: | WANG Li-chan ZHANG Shu-min YU Mo-song YANG Xiao-ming |
| Abstract: | |
| Keywords: | Staphylococcal enterotoxin B Superantigen Gene clone Prokaryotic expression PCR Western blot |
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