加味人参乌梅汤调控腹泻大鼠GABA能信号通路的系统效应

目的 研究加味人参乌梅汤对腹泻模型大鼠结肠组织中γ-氨基丁酸（GABA）能信号通路相关调控因子的影响，进一步揭示加味人参乌梅汤益气生津止泻的作用机制。方法 从48只SD幼龄大鼠中随机抽取12只作为正常组，其余大鼠以番泻叶泻下、劳倦力竭及饮食失宜等复合因素造模14 d。造模成功后，随机分为模型组、西药组及中药组，每组12只。正常组与模型组给予生理盐水灌胃（20 mL·kg^-1），西药组给予妈咪爱灌胃（0.7 g·kg^-1），中药组给予加味人参乌梅汤灌胃（35 g·kg^-1），均1次/d，连续干预7 d。每日观测记录大鼠一般情况、稀便率及腹泻指数。获取大鼠结肠标本，采用免疫组化法（IHC）检测大鼠结肠GABA蛋白积分吸光度表达；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B2（Akt2）、磷酸化（p-）Akt及白细胞介素-1β（IL-1β）的含量，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠结肠PI3K、Akt2及γ-氨基丁酸A型受体β₂亚基（GABRB2） mRNA和蛋白的表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠一般情况明显变差，稀便率及腹泻指数差异无统计学意义，GABA蛋白表达明显升高（P<0.05），PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β表达含量明显升高（P<0.05，P<0.01），PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA及蛋白表达均极显著升高（P<0.01）。与模型组比较，中药组、西药组大鼠一般情况明显好转，稀便率及腹泻指数显著下调（P<0.01），中药组、西药组PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β含量均明显下调（P<0.05），中药组PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA均明显下调（P<0.05，P<0.01），GABA、PI3K及GABRB2蛋白表达明显下调（P<0.05，P<0.01）；西药组PI3K及Akt2 mRNA和PI3K蛋白表达均明显下降（P<0.05）。结论 加味人参乌梅汤能通过调节腹泻大鼠结肠GABA能信号通路，减少肠上皮细胞中Cl^-向肠腔流动，改善腹泻模型大鼠结肠水液代谢失衡状态，进而发挥其益气生津止泻效应。

Systematic Effect of Modified Renshen Wumeitang in Regulation of GABA Signaling Pathway in Rats with Diarrhea