基于肠道微生态探究参苓固肠方对妊娠期糖尿病大鼠的影响

目的 研究参苓固肠方通过调节肠道菌群及其产物短链脂肪酸干预妊娠期糖尿病大鼠血糖的作用机制。方法 从受孕成功的36只孕鼠中随机选取30只孕鼠进行造模。造模大鼠予以高脂高糖饲料喂养1周后，连续3 d予以35 mg·kg^-1链脲佐菌素（STZ）构建妊娠期糖尿病模型，造模成功后随机分为模型组、二甲双胍组、参苓固肠方高、中、低剂量组，分别予以18、9、4.5 mg·kg^-1的参苓固肠方溶液灌胃，二甲双胍组予以52.5 mg·kg^-1药物溶液灌胃，空白组、模型组予以等体积生理盐水灌胃。末次给药24 h后，鼠尾尖采血检测末次血糖，麻醉下腹主动脉采血，生化法测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测脂多糖（LPS）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、胰岛素（INS）；取大鼠肠道组织，苏木素-伊红（HE）染色法观察肠道组织病理变化；取大鼠粪便标本，16s rRNA测序检测肠道菌群，气相色谱法检测短链脂肪酸。结果 与空白组比较，模型组大鼠不良妊娠结局发生率明显升高（P<0.05），与模型组比较，参苓固肠方各剂量组及二甲双胍组不良妊娠结局发生率明显降低（P<0.05）；与空白组比较，模型组血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C、LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显升高（P<0.05），肠道组织均有不同程度的炎性改变及黏膜损伤，与模型组比较，参苓固肠方各剂量组及二甲双胍组血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C、LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α等水平有所下调（P<0.05），肠道炎症及肠黏膜损伤得到改善；与空白组比较，模型组肠道菌群功能结构及多样性发生改变（P<0.05），与模型组比较，参苓固肠方各剂量组及二甲双胍组肠道菌群功能结构及多样性回调，趋势接近空白组（P<0.05）；与空白组比较，模型组大鼠大肠埃希菌、肠球菌、克雷伯氏杆菌、杜氏菌等致病菌丰度明显升高，普雷氏菌、拟普雷氏菌、阿克曼菌、罗姆布茨菌、毛螺菌等益生菌丰度减少（P<0.05）；与模型组比较，参苓固肠方各剂量组及二甲双胍缓释组大肠埃希菌、肠球菌、克雷伯氏杆菌、杜氏菌等致病菌丰度降低（P<0.05），普雷氏菌、拟普雷氏菌、阿克曼菌、罗姆布茨菌、毛螺菌等益生菌丰度上调（P<0.05）；与空白组比较，模型组大鼠短链脂肪酸含量明显降低（P<0.05），与模型组比较，参苓固肠方各剂量组及二甲双胍组短链脂肪酸含量增加（P<0.05）。相关性分析表明，在妊娠期糖尿病中，变形菌门与炎症因子、血糖、血脂呈正相关性（P<0.05）。结论 参苓固肠方对妊娠期糖尿病大鼠血糖、血脂、不良妊娠结局有良好的调节作用，其疗效与二甲双胍缓释片相当，其作用机制可能与调节肠道菌群结构，增加短链脂肪酸含量，降低LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α，改善肠道炎症有关。