法舒地尔和RhoA沉默对神经干细胞增殖的影响

背景：Rho及其相关分子在神经轴突生长、分化、延伸及突触形成中起重要作用，阻断和抑制RhoA/ROCK通路可促进神经干细胞的增殖与生长。 目的：观察Rho激酶抑制剂法舒地尔和RNAi介导的RhoA基因沉默对大鼠神经干细胞增殖的影响。 方法：体外培养Wistar胎鼠神经干细胞，分6组干预：空白对照组，5，10，15，20 μmol/L 法舒地尔组，siRNA 沉默RhoA基因组。干预后第3天，采用RT-PCR，Western blot检测各组神经干细胞RhoA基因及蛋白的表达。应用MTT比色法观察神经干细胞增殖情况；采用流式细胞术测定神经干细胞周期分布的变化。 结果与结论：15，20 μmol/L 法舒地尔组、siRNA 沉默RhoA基因组神经干细胞RhoA基因及蛋白表达量较5，10 μmol/L 法舒地尔组、空白对照组明显降低(P < 0.05)，细胞的生长速度较5，10 μmol/L 法舒地尔组、空白对照组明显增快(P < 0.05)，细胞周期G0/G1期减少(P < 0.05)，S期细胞数增多(P < 0.05)。当法舒地尔浓度增加到20 μmol/L时对细胞的作用并非随浓度的增加而增强，与15 μmol/L组的差异无显著性意义(P > 0.05)。15，20 μmol/L 法舒地尔组与siRNA 沉默RhoA基因组相比差异无显著性意义(P > 0.05)。说明Rho激酶抑制剂法舒地尔和RNAi介导的RhoA基因沉默在体外均能促进神经干细胞增殖，法舒地尔最佳作用浓度为15 μmol/L。

Effects of fasudil and RhoA silencing on neural stem cell proliferation