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肺炎链球菌TaqMan实时荧光定量PCR的建立及临床应用
引用本文:吕东月,刘和录,何玥,李培培,梁鸿,朱淑娥. 肺炎链球菌TaqMan实时荧光定量PCR的建立及临床应用[J]. 现代检验医学杂志, 2014, 0(5)
作者姓名:吕东月  刘和录  何玥  李培培  梁鸿  朱淑娥
作者单位:广州医科大学附属深圳沙井医院,广东深圳,518104
基金项目:深圳市宝安区科技计划项目(2014184)。
摘    要:
目的:建立TaqMan实时荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法,应用于临床儿童社区获得性肺炎(CAP)标本的快速筛查。方法根据 GenBank公布的肺炎链球菌自溶酶基因(lytA)设计引物和探针,建立实时荧光定量 PCR,并对体系进行优化;同时以痰培养法做双盲对照,应用于1504份 CAP患儿标本检测。结果 TaqMan实时荧光定量 PCR菌液的最低检出限可达18.75 cfu/PCR,无交叉反应,特异度好;对1504份儿童CAP标本检测,141份肺炎链球菌实时荧光定量PCR阳性,其中140份肺炎链球菌痰培养阳性,该方法灵敏度为100%,特异度为99.93%。从样品处理到结果报告仅需2.5 h。结论 TaqMan实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强,可用于儿童CAP中肺炎链球菌的初筛和指导抗生素的的合理使用。

关 键 词:TaqMan实时荧光定量PCR  儿童社区获得性肺炎  肺炎链球菌  快速检测

Establishment and Application of TaqMan Real-Time PCR assay for Diagnosis of Streptococcus Pneumoniae
LU Dong-yue,LIU He-lu,HE Yue,LI Pei-pei,LIANG Hong,ZHU Shu-e. Establishment and Application of TaqMan Real-Time PCR assay for Diagnosis of Streptococcus Pneumoniae[J]. Journal of Modern Laboratory Medicine, 2014, 0(5)
Authors:LU Dong-yue  LIU He-lu  HE Yue  LI Pei-pei  LIANG Hong  ZHU Shu-e
Abstract:
Keywords:TaqMan real-time PCR  children CAP  streptococcus pneumonia  rapid diagnosis
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