| 大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养和生物学特性的研究 |
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| 引用本文： | 邓春华,孙祥宙,高勇,罗道升,刘贵华,黄燕平.大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养和生物学特性的研究[J].男科学报,2008,14(2):99-105. |
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| 作者姓名： | 邓春华 孙祥宙 高勇 罗道升 刘贵华 黄燕平 |
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| 作者单位： | 中山大学附属第一医院泌尿外科,广东广州510080 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金（07001628）;广东省科技计划项目（2003C34008）;广东省卫生厅基金（B2004034）.致谢：感谢Professor Ching-Shwun Lin and Doctor Gui-ting Lin（Department of Urology,University of California,San Francisco,U.S.A）提供了技术指导,感谢李朝红教授、黄锦桃技师（中山大学中山医学院组胚教研室）提供了实验设备和技术指导. |
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| 摘 要： | 目的：建立一种分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法，并探讨获得的脂肪干细胞的部分生物学特性。方法：取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪，Ⅰ型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞，接种至含10％胎牛血清的DMEM培养液，培养并适时传代，每日在倒置显微镜下观察记录细胞形态和增殖特征，测定其生长曲线，进行冻存复苏实验。第3代细胞使用成骨诱导液诱导其向成骨细胞分化，进行Von Kossa染色；使用成脂诱导液诱导其向成脂细胞分化，进行油红O染色。结果：从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞，其在体外生长增殖迅速，呈成纤维样细胞生长。生长曲线表明第3代脂肪干细胞增殖能力最强，可以在地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠的诱导下，表现出成骨细胞特性，Von Kossa染色出现矿化结节；在IBMX（3-异丁基-1-甲基黄嘌呤）、吲哚美辛、胰岛素的诱导下，表现出脂肪细胞特性，油红O染色后发现胞浆内有脂肪滴。脂肪干细胞在液氮中冻存1个月后，其生长增殖活性和多向分化能力没有明显降低。结论：成功建立了一种简单有效的分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法，获得的脂肪干细胞生长增殖旺盛，具有多向分化能力，可以方便地保存，有望作为细胞治疗和组织工程的种子细胞。在分离大鼠的脂肪干细胞时，NH4Cl裂解红细胞这一步可以省略，地塞米松在成脂诱导过程中不是必需的。
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| 关 键 词： | 脂肪干细胞 大鼠 成骨诱导 成脂诱导 |
| 文章编号： | 1009-3591（2008）02-0099-07 |
| 收稿时间： | 2007-11-20 |
| 修稿时间： | 2007-12-10 |
An Experimental Study of the Cultrure, Isolation and Biological Characteristics of Rat Adipose Tissue-derived Stromal Cells in vitro |
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| Authors: | DENG Chun-hua SUN Xiang-zhou GAO Yong LUO Dao-sheng LIU Gui-hua HUANG Yan-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adipose tissue-derived stromal cells rat osteogenic induction adipogenic induction |
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