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重组人IL2-MUCl融合蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定
引用本文:周静,马吉春,赵小霞,方芳,宋献美,柳忠辉,台桂香. 重组人IL2-MUCl融合蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定[J]. 吉林大学学报(医学版), 2008, 34(5): 763-766
作者姓名:周静  马吉春  赵小霞  方芳  宋献美  柳忠辉  台桂香
作者单位:吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院黏免疫学教研室,吉林,长春,130021
基金项目:教育部留学回国人员科研启动基金,教育部留学回国人员科研启动基金
摘    要:
目的:构建表达人IL2-MUCI融合蛋白的工程菌,为制备新型MUCI疫苗提供实验依据.方法:通过PCR方法钓取人IL-2基因片段,将其克隆入pBS-SK-MUCI重组载体中,再将人IL2-M-UCI串联基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-I.将重组的pGEX-IL2-MUCI转化大肠杆菌BL-21,通过IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白.结果:经酶切及基因测序证实获得的IL-2基因片段402 bp及IL2-MUCI基因片段852 bp基因序列正确;构建的pGEX-IL2-MUCI表达载体在BL21大肠杆菌中成功表达GST-IL2-MUCI蛋白,经SDS-PAGE证实其相对分子质量为64 000,与理论预期值相符.Western blotting分析表明该表达产物与抗人MUCI多克隆抗体及抗人IL-2单克隆抗体均具有特异性结合能力.结论:成功构建表达人IL2-MUCl融合蛋白的工程菌,为进一步研究以人MUCI为靶点的新型抗肿瘤疫苗奠定基础.

关 键 词:黏蛋白1  白细胞介素2  基因克隆  原核表达

Expression and identification of recombinant human IL-2 and MUCI fusion protein in E.coli BL21
ZHOU Jing,MA Ji-chun,ZHAO Xiao-xia,FANG Fang,SONG Xian-mei,LIU Zhong-hui,TAI Gui-xiang. Expression and identification of recombinant human IL-2 and MUCI fusion protein in E.coli BL21[J]. Journal of Jilin University: Med Ed, 2008, 34(5): 763-766
Authors:ZHOU Jing  MA Ji-chun  ZHAO Xiao-xia  FANG Fang  SONG Xian-mei  LIU Zhong-hui  TAI Gui-xiang
Abstract:
Keywords:
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