人膀胱癌异质性表型相关基因的筛选与鉴定

目的 筛选和鉴定膀胱肿瘤异质性生物学表型相关的基因。方法 以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系为材料，采用抑制性削减杂交技术筛选差异表达的基因片段，构建cDNA文库；挑取克隆进行筛选，获得差异表达片段，测序并与Genbank比对，Northernblotting验证差异片段在两株细胞系的不同表达。结果 建立了两个消减文库，分别含有168和206个白色克隆，白色克隆含有约200～700bp的插入片段，对这些克隆进行筛选，获得35个差异表达基因片段，其中15个对应于细胞骨架蛋白、细胞代谢酶基因等已知基因，另外19个为未知功能基因，1个为新EST片段，注册Genbank（注册号为DR008207）。结论 抑制性消减杂交技术是筛选、克隆差异表达基因的有效手段；keratin7、Vimentin等细胞骨架蛋白的不同表达，与细胞形态的表型差异有关；DDH等代谢基因的不同。与细胞的药物敏感性差异相关；筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础。

Screening and identification of heterogeneous phenotype-associated genes in human bladder cancer