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FasL基因重组慢病毒载体感染SD大鼠树突状细胞的研究
引用本文:乐克平,孙晓青,陈仁富,陈伟,孙晓磊. FasL基因重组慢病毒载体感染SD大鼠树突状细胞的研究[J]. 医学分子生物学杂志, 2010, 7(6). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.06.005
作者姓名:乐克平  孙晓青  陈仁富  陈伟  孙晓磊
作者单位:江苏省姜堰市人民医院泌尿外科,江苏省姜堰市,225500;徐州医学院附属医院泌尿外科实验室,江苏省徐州市,221002;徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏省徐州市,221002;徐州医学院附属医院泌尿外科实验室,江苏省徐州市,221002
基金项目:江苏省卫生厅"135工程"医学重点人才项目
摘    要:
目的 探讨FasL基因重组慢病毒载体感染SD大鼠树突状细胞的效率和FasI 蛋白的表达情况,为进一步研究转FasL基因在同种异体器官移植中诱导免疫耐受和保护移植物打下基础.方法 将培养一周的细胞重铺于六孔板中,每孔细胞数量为5×105,24 h后观察,细胞适合感染,按照MOI=10感染细胞,使用GFP阳性对照质粒作对照实验,感染24 h后,培养皿中添加1 ml新鲜培养基,每隔1 d加细胞因子继续培养,荧光显微镜观察荧光强度和数量,添加病毒液后10 d收集细胞进行实时定量检测和WB检测.结果 FasL基困重组慢病毒载体感染DC 8 d后,细胞开始出现荧光,10 d感染效率为100%;实时定量PCR检测瞬时转染后目的 基因的表达显示以细胞的1.00%为参照,Cell+FasL质粒为167.03%;免疫印迹检测转染后FasL蛋白的表达显示以细胞的1.00%为参照,细胞+FasL质粒为34.15%.结论 FasL基因重组慢病毒载体成功感染DC,实时定量PCR及Western印迹证实感染的Dc表达FasL明显提高.为进一步研究转FasL摹因在同种异体器官移植中诱导免疫耐受和保护移植物打下基础.

关 键 词:FasL基因  重组慢病毒载体  树突状细胞  移植免疫耐受

Infection of SD Rat Dendritic Cells with the Recombinant Lentiviral Vector Containing FasL Gene
YUE Keping,SUN Xiaoqing,CHEN Renfu,CHEN Wei,SUN Xiaolei. Infection of SD Rat Dendritic Cells with the Recombinant Lentiviral Vector Containing FasL Gene[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2010, 7(6). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.06.005
Authors:YUE Keping  SUN Xiaoqing  CHEN Renfu  CHEN Wei  SUN Xiaolei
Abstract:
Keywords:
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