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红景天属植物DALP反应体系的建立
引用本文:李永谊,虞泓,朱荣勋,和锐,倪念春.红景天属植物DALP反应体系的建立[J].医学教育探索,2005(3):419-423.
作者姓名:李永谊  虞泓  朱荣勋  和锐  倪念春
作者单位:云南英茂生物技术实验室,云南英茂生物技术实验室,云南英茂生物技术实验室,云南英茂生物技术实验室,云南英茂生物技术实验室 云南 昆明 650106,云南 昆明 650106,云南大学生命科学学院生态遗传学实验室,云南 昆明 650091,云南 昆明 650106,云南 昆明 650106,云南 昆明 650106
基金项目:中药现代化科技产业(云南)基地专项资助项目(2002ZY-18)
摘    要:目的 利用直接扩增片段长度多态(DALP)这一新分子标记技术建立一套稳定的红景天属植物的DALP反应体系。方法 以红景天基因组DNA为模板,对DALP反应程序的一些重要参数进行摸索和优化试验。结果 建立了一套稳定性强、可靠性高的DALP应用反应体系;经过大量重复性实验,反应体系为20μL,Mg2 浓度为2.5 mmol/L,dNTPs浓度为1.25 mmol/L,模板DNA的量为60 ng,5 pmol/L选择性引物1μL,5 pmol/L反向引物3 μL,引物浓度比为1:3,Taq酶2 U。反应过程为:95℃预变性5 min、94℃变性30 s、50℃退火30 s、72℃延伸1 min;30个循环,再72℃延伸10 min,完成整个PCR反应。结论 该体系可有效地应用于红景天属药材的分类鉴定和地道性鉴定。

关 键 词:红景天属  直接扩增片段长度多态性  分子标记  反直体系

Establishment of DALP reaction system for plants of Rhodiola L.
LI Yong-yi,YU Hong,ZHU Rong-xun,HE Rui,NI Nian-chun.Establishment of DALP reaction system for plants of Rhodiola L.[J].Researches in Medical Education,2005(3):419-423.
Authors:LI Yong-yi  YU Hong  ZHU Rong-xun  HE Rui  NI Nian-chun
Abstract:
Keywords:Rhodiola L    direct amplification of length polymorphism (DALP)  molecular marker  reaction system  
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