| MMP-9反义RNA真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 唐琳,陈奎生,张岚,张云汉,高冬玲. MMP-9反义RNA真核表达载体的构建及鉴定[J]. 山东医药, 2005, 45(16): 13-14 |
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| 作者姓名： | 唐琳 陈奎生 张岚 张云汉 高冬玲 |
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| 作者单位： | 河南省肿瘤病理重点实验室,河南郑州,450052 |
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| 基金项目： | 国家“十五”“211”工程重点学科建设项目[教重办(2002)第2号]，河南省医学科技创新人才工程资助项目(No.2003112007) |
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| 摘 要： | 目的构建MMP-9反义RNA真核表达载体。方法提取胃癌组织总RNA，按照GenBank中检索的MMP-9基因cDNA序列，设计并合成反义MMP-9基因片段引物．进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)．先将扩增产物克隆至pGEM—T载体，再将其反向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3．1中．然后对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析。结果PCR扩增出的反义片段与预期长度相符。构建的MMP-9反义RNA表达质粒pcDNA3．1-MMP-9分别作PCR及双酶切(BamHⅠ和HindⅡ)鉴定．证实其中有目的片段完整插入．插入片段测序结果与反义MMP-9序列设计完全一致。结论成功构建了MMP-9反义RNA真核表达载体pcDNA3．1-MMP-9，为进一步研究MMP-9蛋白分子的生物学功能和以MMP-9为靶点的恶性肿瘤的基因治疗研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | MMP-9 表达载体 反义 基因克隆 |
Construction and identification of the eukaryotic antisense RNA expression vector of MMP-9 |
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| Tang Lin,Chen Kuisheng,Zhang Lan,et al. Construction and identification of the eukaryotic antisense RNA expression vector of MMP-9[J]. Shandong Medical Journal, 2005, 45(16): 13-14 |
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| Authors: | Tang Lin Chen Kuisheng Zhang Lan et al |
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| Keywords: | MMP-9 Expression vector Antisense Gene clone |
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