人白细胞介素15cDNA克隆及其在大肠杆菌中表达 |
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作者姓名: | 王盛典 张叔人 |
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作者单位: | 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫一室 |
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摘 要: | 从LPS活化的人外周血单核细胞总RNA中,用RTPCR方法扩增出编码成熟人白细胞介素15(hIL15)的cDNA,并将其克隆于pBlueSkm质粒中,序列测定结果与预期一致。再将hIL15cDNA克隆于表达载体pBV220,构建了高效表达克隆pBVIL15。热诱导4h,hIL15蛋白表达即达高峰。表达的重组蛋白经SDSPAGE及凝胶密度扫描分析,分子量约13kD,占菌体总蛋白的33%,经包涵体提取及SephacrylS100凝胶过滤纯化,重组蛋白纯度达95%以上,具有显著的促鼠T淋巴母细胞增殖作用
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关 键 词: | 白细胞介素 cDNA 克隆 大肠杆菌 |
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