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| HIV-1整合酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达和定位 | |
| 引用本文： | 谷万港,张丽,张旋. HIV-1整合酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达和定位[J]. 昆明医学院学报, 2013, 0(9): 42-45 |
| 作者姓名： | 谷万港 张丽 张旋 |
| 作者单位： | 1. 遵义医学院基础医学院免疫学教研室,贵州遵义,563000 2. 昆明医科大学学报编辑部 3. 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,云南昆明,650500 |
| 摘 要： | 目的构建重组基因表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN并观察其在Hela细胞中的表达.对HIV-1整合酶表达以后在细胞里的定位情况进行研究.方法通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN.以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞.细胞用4%的多聚甲醛固定以后,经过PI对细胞核染色,整合酶抗体跟整合酶反应以后,用FITC标记的二抗进行孵育,用共聚焦显微镜观测整合酶在细胞中的表达情况.结果经过定向克隆和测序鉴定证实,重组真核表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN构建成功.免疫荧光实验显示,Lipofectamine2000介导质粒转染Hela表达成功,整合酶主要定位在细胞核.结论 HIV-1整合酶真核表达载体构建成功,转染以后,整合酶表达并且主要定位在细胞核. |
| 关 键 词： | HIV-1 整合酶 细胞核 FITC |
Construction of Eukaryotic Expression Vector with HIV-1 Integrase for Expression in Hela Cells |
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| GU Wan-gang , ZHANG Li , ZHANG Xuan. Construction of Eukaryotic Expression Vector with HIV-1 Integrase for Expression in Hela Cells[J]. Journal of Kunming Medical College, 2013, 0(9): 42-45 | |
| Authors: | GU Wan-gang ZHANG Li ZHANG Xuan |
| Affiliation: | GU Wan-gang;ZHANG Li;ZHANG Xuan;Dept. of Immunology, Zunyi Medical College;Editorial Department of Kunming Medical University;School of Pharmaceutical Science & Yunnan Key Laboratory of Pharmacology for Natural Products, Kunming Medical University; |
| Abstract: | |
| Keywords: | HIV-1 integrase Eukaryotic expression vector The nuclei FITC |
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