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RNA干扰下调LAT1表达对胃腺癌SGC-7901细胞增殖、侵袭、转移及细胞周期的影响
引用本文:黄士隋,史良会,黄广岩. RNA干扰下调LAT1表达对胃腺癌SGC-7901细胞增殖、侵袭、转移及细胞周期的影响[J]. 第三军医大学学报, 2013, 35(4): 320-324
作者姓名:黄士隋  史良会  黄广岩
作者单位:皖南医学院附属弋矶山医院胃肠外科,安徽芜湖,241001
基金项目:安徽省高校自然科学研究基金重点项目
摘    要:目的观察下调胃癌细胞SGC-7901的LAT1表达对其体外增殖、迁移、侵袭的影响。方法设计并合成2条针对编码LAT1的SLC7A5 mRNA寡核苷酸干扰序列和阴性对照序列,连接pGPU6/GFP/Neo质粒载体上,分别转染至细胞株SGC-7901,RT-PCR与Western blot检测干扰后LAT1、LAT1异二聚体CD98hc mRNA与蛋白表达量,筛选出抑制率较高的质粒,用G418筛选出稳定表达干扰序列的胃癌细胞株。MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell小室检测细胞迁移与侵袭能力。结果酶切电泳分析和DNA测序证实成功构建LAT1-shRNA质粒,转染48 h后,与空白对照组和阴性对照质粒转染组相比,LAT1-shRNA1与LAT1-shRNA2重组载体转染胃癌SGC-7901细胞后对LAT1 mRNA表达及LAT1蛋白表达均有抑制作用,LAT1-shRNA2重组载体抑制效率最高,但CD98hc未见明显变化。与空白对照组和阴性对照转染组比较,LAT1的表达下调后,胃癌细胞SGC-7901的增殖、迁移与侵袭能力均受到一定程度的抑制(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明,细胞阻滞于G0/G1期。结论下调LAT1的表达对胃癌细胞SGC-7901的体外增殖、迁移与侵袭有抑制作用,并且细胞周期被阻滞,LAT1在人胃癌细胞增殖、迁移与侵袭中发挥重要作用。

关 键 词:LAT1  胃癌细胞SGC-7901  RNA干扰  增殖  迁移  侵袭

Effect of RNA interference targeting LAT1 on proliferation, migration and invasion of SGC7901 cells
Huang Shisui,Shi Lianghui,Huang Guangyan. Effect of RNA interference targeting LAT1 on proliferation, migration and invasion of SGC7901 cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2013, 35(4): 320-324
Authors:Huang Shisui  Shi Lianghui  Huang Guangyan
Affiliation:(Department of Gastrointestinal Surgerys,Yijishan Hospital,Wannan Medical College,Wuhu,Anhui Province,241001,China)
Abstract:
Keywords:
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