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10-23脱氧核酶对新生大鼠心肌细胞ET-1mRNA表达的影响
引用本文:潘秀颉,林丽,潘燕霞,袁文俊. 10-23脱氧核酶对新生大鼠心肌细胞ET-1mRNA表达的影响[J]. 第二军医大学学报, 2004, 25(10): 1106-1109
作者姓名:潘秀颉  林丽  潘燕霞  袁文俊
作者单位:第二军医大学基础医学部生理学教研室,上海,2004332;第二军医大学基础医学部生理学教研室,上海,2004332;福建医科大学生理学与病理生理学系,福州,350004
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),国家自然科学基金
摘    要:目的:将体外筛选具有切割内皮素-1(endothelin-1,ET-1)mRNA的10-23脱氧核酶转染原代培养新生大鼠心肌细胞,观察其对心肌细胞ET-1 mRNA的影响.方法:体外转录ET-1全长RNA底物,设计并合成5条ET-1 10-23脱氧核酶(DZ1~DZ5),其5‘及3‘端各有2个核苷酸硫代修饰,体外切割ET-1 RNA底物,筛选有效脱氧核酶;5‘标记荧光素FAM的10-23脱氧核酶瞬间转染新生大鼠心肌细胞以观察对10-23脱氧核酶的摄取;采用半定量RT-PCR检测ET-1基因的表达.结果:DZ2、DZ3、DZ4及DZ5在体外均可切割RNA底物,其中DZ4两侧结合区结合自由能之差最大,其切割效率最高,达83.5%,而DZ3两侧结合区结合自由能之差最小,其切割效率亦最低(47.3%);瞬间转染新生大鼠心肌细胞24h,心肌细胞内可见10-23脱氧核酶的分布,半定量RT-PCR结果显示转染24h后的DZ4(0.2μmol/L)可减少血清诱导肥大心肌细胞ET-1mRNA及细胞总蛋白,降低细胞活力与蛋白质合成速率(P<0.05).结论:本研究设计的10-23脱氧核酶能切割体外转录的ET-1全长RNA底物,转染心肌细胞后,可抑制ET-1 mRNA的表达,减缓血清诱导心肌细胞肥大,10-23脱氧核酶两侧结合区自由能的差值与切割效率有关.

关 键 词:10-23脱氧核酶  内皮素  心肌细胞  肥大
文章编号:0258-879X(2004)10-1106-04
收稿时间:2004-03-20
修稿时间:2004-03-20

Effects of 10-23 deoxyribozyme on endothelin-1 mRNA expression in rat neonatal cardiomyocytes
PAN Xiu-Jie ,LIN Li ,PAN Yan-Xia ,,YUAN Wen-Jun. Effects of 10-23 deoxyribozyme on endothelin-1 mRNA expression in rat neonatal cardiomyocytes[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2004, 25(10): 1106-1109
Authors:PAN Xiu-Jie   LIN Li   PAN Yan-Xia     YUAN Wen-Jun
Affiliation:PAN Xiu-Jie 1,LIN Li 1,PAN Yan-Xia 1,2,YUAN Wen-Jun 1*
Abstract:
Keywords:10-23 deoxyribozyme  endothelin  cardiomyocytes  hypertrophy
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