| 转录因子STAT5A启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 陈敏娜,李春兰,刘静. 转录因子STAT5A启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及鉴定[J]. 癌变．畸变．突变, 2022, 34(1): 53. DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2022.01.010 |
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| 作者姓名： | 陈敏娜 李春兰 刘静 |
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| 作者单位： | 1. 汕头大学医学院附属肿瘤医院乳腺内科, 广东 汕头 515041;2. 汕头大学医学院广东省乳腺癌诊治研究重点实验室/长江学者实验室/生理学教研室, 广东 汕头 515041 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金(2021A1515012180,2016A030312008);汕头市医疗卫生科技计划项目(200604125265614,200617105260368);汕头大学医学院附属肿瘤医院青年科研基金(2020A007);广东省科技创新战略专项资金(汕府科2018-49,汕府科2019-132)。 |
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| 摘 要： | ![]()
目的： 利用分子克隆的方法构建转录因子STAT5A启动子荧光素酶报告基因质粒并鉴定其效应。方法： 以乳腺癌MCF7细胞基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增STAT5A基因的启动子序列，并将其克隆至荧光素酶报告基因质粒pGL3-Enhancer中，经过菌液扩增、酶切、测序等方法获得目的质粒，并通过双荧光报告基因实验进一步验证其功能。结果： 构建的STAT5A启动子荧光素酶报告基因质粒pGL3-STAT5A-pro-luc-E序列正确，且具有转录活性。在双荧光报告基因实验中发现重组载体pGL3-STAT5A-pro-luc-E荧光素酶的相对活性约为阴性对照pGL3-Enhancer的8倍（P<0.01），而pGL3-STAT5A-pro-N-luc-E荧光素酶的相对活性约是阴性对照pGL3-Enhancer的6倍（P<0.01）。结论： 本项目成功构建了转录因子STAT5A启动子荧光素酶报告基因质粒，为进一步研究STAT信号转导及转录激活蛋白信号通路提供了重要的研究工具。
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| 关 键 词： | STAT5A 启动子 报告基因 荧光素酶 PCR |
| 收稿时间： | 2021-07-06 |
| 修稿时间： | 2021-12-28 |
Construction and identification of luciferase reporter plasmids for the transcription factor STAT5A promoter |
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| CHEN Minna,LI Chunlan,LIU Jing. Construction and identification of luciferase reporter plasmids for the transcription factor STAT5A promoter[J]. Carcinogenesis,Teratogenesis and Mutagenesis, 2022, 34(1): 53. DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2022.01.010 |
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| Authors: | CHEN Minna LI Chunlan LIU Jing |
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| Affiliation: | 1. Department of Medical Oncology, Cancer Hospital of Shantou University Medical College, Shantou 515041;2. Guangdong Provincial Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Breast Cancer/Changjiang Scholar's Laboratory/Department of Physiology, Shantou University Medical College, Shantou 515041, Guangdong, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | STAT5A promoter reporter gene luciferase PCR |
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