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结核分枝杆菌Rv1009基因蛋白的克隆和表达
引用本文:杨柳,苏哲,岳乔红,周萍,苏明权,刘家云,郝晓柯.结核分枝杆菌Rv1009基因蛋白的克隆和表达[J].中国防痨杂志,2007,29(1):12-14.
作者姓名:杨柳  苏哲  岳乔红  周萍  苏明权  刘家云  郝晓柯
作者单位:[1]第四军医大学西京医院,西安710032 [2]宝鸡解放军第三医院,宝鸡721004 [3]交通大学第一医院,西安710061
摘    要:目的 克隆表达结核分枝杆菌促Rv1009基因,序列测定正确后进行融合、表达.方法 采用热启动聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入pGEX 4T-2载体中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),目的基因经IPTG诱导,表达Rv1009基因蛋白.结果 经PCR扩增在1300bp处发现一条目的片段,获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009基因蛋白,经诱导后高效表达分子量为64KD的外源蛋白,与预期分子量大小一致,凝胶自动扫描分析,在A600值为0.6,IPTG终浓度为0.3 mmol/L,诱导表达3 h时融合蛋白表达量即达峰值,占菌体总蛋白的22.8%.结论 构建了结核分枝杆菌Rv1009基因重组表达载体,获得了RPF样融合蛋白的高效表达,为今后深入研究奠定了基础.

关 键 词:分枝杆菌  结核  Rv1009基因  克隆  表达
修稿时间:2005-12-22

Clone and expression Of Mycobacterium tuberculosis gene Rv1009 in E. coli
Yang Liu , Su Zhe , Yue Qiaohong ,et al..Clone and expression Of Mycobacterium tuberculosis gene Rv1009 in E. coli[J].The Journal of The Chinese Antituberculosis Association,2007,29(1):12-14.
Authors:Yang Liu  Su Zhe  Yue Qiaohong  
Institution:Yang Liu , Su Zhe , Yue Qiaohong , et al.
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis  Rv1009 gene  gene recombination
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