| miR-429对CRKL表达的靶向调控作用研究 |
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| 引用本文： | 郭春梅,刘淑清,孙明忠. miR-429对CRKL表达的靶向调控作用研究[J]. 大连医科大学学报, 2018, 40(3): 198-204. DOI: 10.11724/jdmu.2018.03.02 |
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| 作者姓名： | 郭春梅 刘淑清 孙明忠 |
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| 作者单位： | 1. 大连医科大学 生物技术系,辽宁大连,116044;2. 大连医科大学 生物化学与分子生物学教研室,辽宁大连,116044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81272186),辽宁省自然科学基金项目(2015020266),辽宁省教育厅基本科研项目(5061092) |
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| 摘 要： | 目的 探讨miR-429对CRKL的靶向调控作用.方法 构建双荧光素野生型psiCHECK-2-CRKL-3'-UTR-WT及突变型psiCHECK-2-CRKL-3'-UTR-MUT重组表达载体,双荧光素酶报告实验检测miR-429与CRKL-3'-UTR的靶向结合;瞬时转染miR-429模拟物及其抑制剂,qRT-PCR和Westernblot检测miR-429对内源性CRKL表达水平变化的影响;qRT-PCR检测CRKL上、下调对内源性miR-429表达水平变化的影响.结果 双荧光素报告实验结果表明miR-429直接靶向CRKL-3'-UTR第2个结合位点;同时与HepG2-miR-NC相比,miR-429上调使内源性CRKL蛋白下调了(55.0±1.5)％(P =0.0089),与HepG2-LNA-miR-429相比,miR-429下调使内源性CRKL蛋白上调了(44.3±1.0)％(P =0.0038),差异具有统计学意义,而miR-429上、下调对内源性CRKL mRNA表达变化无影响;且与HepG2-shNC相比,CRKL下调使内源性miR-429表达上调了(102.8±20.0)％(P =0.0069),与HepG2-PCDH相比,CRKL上调使内源性miR-429表达下调了(92.4±3.2)％(P =0.0009),差异具有统计学意义.结论 miR-429靶向作用于CRKL-3'-UTR在转录后蛋白翻译水平负性调控CRKL表达,同时CRKL负性调控内源性miR-429的表达.
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| 关 键 词： | miR-429 CRKL 负性调控 |
| 收稿时间： | 2018-01-16 |
Target regulating of miR-429 on CRKL expression |
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| SUN Mingzhong,LIU Shuqing,GUO Chunmei. Target regulating of miR-429 on CRKL expression[J]. Journal of Dalian Medical University, 2018, 40(3): 198-204. DOI: 10.11724/jdmu.2018.03.02 |
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| Authors: | SUN Mingzhong LIU Shuqing GUO Chunmei |
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| Affiliation: | Department of Biotechnology, Dalian Medical University, Dalian 116044, China,Department of Biochemistry, Dalian Medical University, Dalian 116044, China and Department of Biotechnology, Dalian Medical University, Dalian 116044, China |
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| Abstract: | |
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