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| 抗人γ-精浆蛋白单链抗体四聚体的构建及表达 | |
| 引用本文： | 武国军,王栋,于磊,王禾,陈宝琦,袁建林. 抗人γ-精浆蛋白单链抗体四聚体的构建及表达[J]. 中华实验外科杂志, 2003, 20(6): 543-545 |
| 作者姓名： | 武国军 王栋 于磊 王禾 陈宝琦 袁建林 |
| 作者单位： | 1. 710032,西安,第四军医大学西京医院泌尿外科 2. 福州军区总医院泌尿外科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3990 0 1 80 )，全军重点实验室研究基金资助项目 (1 997-71-2 2 ) |
| 摘 要： | 目的 构建抗γ 精浆蛋白 (γ Sm )单链抗体 (scFv) /p5 3四聚功能域 ( p5 3TD)融合基因 ,并进行真核表达和活性测定。方法 利用递归聚合酶链反应 (PCR)法扩增IgG3上游铰链区与p5 3TD融合基因 ,克隆入 pUC19载体中构建 pUC19/IgG3 /p5 3克隆载体。将抗γ SmscFv克隆入该载体中 ,构建抗γ SmscFv/p5 3TD融合基因并克隆入真核表达载体 pSecTag2 B ,转染HeLa细胞表达纯化后 ,利用流式细胞仪 (FCM )进行活性测定。结果 获得了抗γ SmscFv/p5 3TD融合基因 ,基因全长 891bp ,可编码 2 97个氨基酸。表达产物经十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western印迹实验证实为约 3 5× 10 3 的特异蛋白条带 ,纯化后经流式细胞仪检测可以特异性地结合PC 3细胞 ,亲和力高于scFv。结论 获得了可与PC 3细胞特异结合的四价抗γ SmscFv ,为进一步临床应用奠定基础。 |
| 关 键 词： | 抗人γ—精浆蛋白 单链抗体 四聚体 构建 基因表达 |
| 修稿时间： | 2002-09-12 |
Construction and expression of tetramerizing single chain Fv antibody gene specific for human γ-seminoprotein |
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| WU Guo-jun ,WANG Dong,YU Lei,et al.. Construction and expression of tetramerizing single chain Fv antibody gene specific for human γ-seminoprotein[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2003, 20(6): 543-545 | |
| Authors: | WU Guo-jun WANG Dong YU Lei et al. |
| Affiliation: | WU Guo-jun *,WANG Dong,YU Lei,et al. *Department of Urology,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an 710032,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | p53 |
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