| 两种克隆方法在3种截短的泡球蚴Em18原核表达载体构建中的比较 |
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| 引用本文： | 张春桃,王俊芳,林仁勇,张彤,王星,卢晓梅,王俨,张琰,温浩. 两种克隆方法在3种截短的泡球蚴Em18原核表达载体构建中的比较[J]. 中国地方病学杂志, 2006, 25(5): 561-564 |
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| 作者姓名： | 张春桃 王俊芳 林仁勇 张彤 王星 卢晓梅 王俨 张琰 温浩 |
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| 作者单位： | 1. 830054,乌鲁木齐,新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室
2. 新疆医科大学基础医学院免疫学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30360097)，新疆重点实验室开放课题基金(XJDX0202-2003-01) |
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| 摘 要： | 目的比较3种截短的泡球蚴Em18基因聚合酶链反应(PCR)扩增产物经TA克隆和直接酶切2种方法,在原核表达质粒构建中的运用。方法PCR扩增带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的3种截短的泡球蚴Em18基因,经2种方法构建3种截短的Em18原核表达质粒：①PCR扩增产物与T载体连接构建T-Em18,重组质粒经EcoRⅠ/XhoⅠ酶切,电泳分离、纯化目的片段,再与经过EcoRⅠ/XhoⅠ酶切的原核表达载体pET41a( )连接；②PCR扩增产物经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切,电泳、纯化,直接与经过相同限制性内切酶酶切的pET41a( )连接。结果先经TA克隆,再经酶切构建3种截短的泡球蚴Em18原核表达载体获得成功。而采用直接酶切PCR扩增产物的构建方法未获得成功。结论TA克隆可用于对直接酶切效果不好的PCR扩增片段与表达载体的连接构建,方法简便高效,可提高带有限制性酶切位点的PCR扩增片段克隆人原核表达载体的效率。
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| 关 键 词： | 克隆，分子 DNA，重组 质粒 |
| 收稿时间： | 2005-11-28 |
| 修稿时间： | 2005-11-28 |
Comparison of two clone methods in construction of expression vector for three truncated Em18 gene of Echinococcus multilocularis |
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| ZHANG Chun-tao, WANG Jun-fang, LIN Ren-yong, ZHANG Tong, WANG Xing, LU Xiao-mei, WANG Yah, ZHANG Yah, WEN Hao.. Comparison of two clone methods in construction of expression vector for three truncated Em18 gene of Echinococcus multilocularis[J]. Chinese Jouranl of Endemiology, 2006, 25(5): 561-564 |
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| Authors: | ZHANG Chun-tao WANG Jun-fang LIN Ren-yong ZHANG Tong WANG Xing LU Xiao-mei WANG Yah ZHANG Yah WEN Hao. |
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| Affiliation: | Xinjiang Key Lab of Hydatid Fundamental Medical Research, first Teaching Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cloning molecular DNA recombiNate Plasmids |
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