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| 高质量重组人干扰素α2b的分离纯化研究 | |
| 作者姓名： | 胡敏进 颜法宝 严伟 王强 华子春 |
| 作者单位： | 1. 江苏靶标生物医药研究所有限公司;2. 南京吉芮康生物技术研究院有限公司;3. 江苏省产业技术研究院医药生物技术研究所(常州南京大学高新技术研究院) |
| 摘 要： | 重组人干扰素2b作为一种上市药物，被广泛用于治疗慢性丙型肝炎、慢性乙型肝炎、恶性黑色素瘤等多种疾病的治疗，产生了良好的临床疗效和经济效益。目前国内厂家生产的重组人干扰素以大肠杆菌基因工程表达为主。大肠杆菌表达的人干扰素2b以包涵体的形式表达，包涵体产物需通过变性复性以及其后的纯化才能获得生物活性。干扰素复性得率低，纯化时需要经过四步色谱处理，工艺繁琐，成本高，而且无法去除未完全复性的中间产物，从而影响产品质量和疗效。建立可溶性重组人干扰素α2b的高密度发酵工艺，并在此基础上，建立其高效、快速和稳定的纯化工艺。通过发酵工艺优化获得可溶性重组人干扰素α2b的高密度发酵，收集菌体后，通过高压破菌、硫酸铵分级沉淀、phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析、Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析、Octyl Sepharose Fast Flow疏水层析进行分离纯化，并对纯化产物进行生物活性分析。重组人干扰素α2b工程菌的发酵密度A600达到38.5,可溶性重组人干扰素α2b占... |
| 关 键 词： | 重组人干扰素α2b 高密度发酵 纯化 离子交换层析 疏水层析 国产填料 |