| 抗旋毛虫肌幼虫ES抗原单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 王妍,安桂珍. 抗旋毛虫肌幼虫ES抗原单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国病原生物学杂志, 2005, 18(4): 255-258 |
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| 作者姓名： | 王妍 安桂珍 |
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| 作者单位： | 天津医科大学寄生虫学教研室,天津,300070 |
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| 摘 要： | 目的制备分泌抗旋毛虫肌幼虫排泄分泌(ES)抗原单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,并对其及分泌的McAb进行鉴定。方法用旋毛虫肌幼虫ES抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌特异性、高滴度McAb的杂交瘤细胞株,制备腹水,进行纯化。ELISA间接法、夹心法和竞争法分别测定McAb滴度、相对亲和力和相加效应,琼脂双扩散试验鉴定免疫球蛋白类型,检测McAb与其他寄生虫抗原的交叉反应。电镜观察杂交瘤细胞超微结构,计数染色体数目及观察杂交瘤细胞分泌McAb的稳定性。结果筛选出2株(B2C12和E11F11)分泌抗旋毛虫肌幼虫ES抗原McAb杂交瘤细胞株。电镜显示,杂交瘤细胞具有肿瘤细胞和浆细胞的特征,胞浆内可见大量分泌颗粒;杂交瘤细胞染色体数目平均为98.6条,均能稳定分泌McAb(属IgM)。B2C12株培养上清液和腹水McAb滴度分别为1∶1280和1∶2.048×104,E11F11株为1∶640和1∶1.024×104,其中前者的相对亲和力较后者稍高。2株McAb识别ES抗原不同的抗原决定簇;且不与其他寄生虫抗原发生交叉反应。结论获得2株抗旋毛虫肌幼虫ES抗原杂交瘤细胞株,均能稳定分泌高滴度、特异性的IgM类McAb,并识别不同的抗原决定簇,为研制旋毛虫病诊断试剂盒和制备基因工程抗体奠定了基础。
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| 关 键 词： | 旋毛虫 肌幼虫 排泄分泌抗原 杂交瘤细胞 单克隆抗体 |
| 文章编号： | 1001-6627(2005)04-0255-04 |
| 修稿时间： | 2004-11-22 |
PREPARATION AND IDENTIFICATION OF McAbs AGAINST ES ANTIGEN OF MUSCLE LARVAE OF TRICHINELLA SPIRALIS |
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| WANG Yan,AN Gui-zhen. PREPARATION AND IDENTIFICATION OF McAbs AGAINST ES ANTIGEN OF MUSCLE LARVAE OF TRICHINELLA SPIRALIS[J]. Journal of Pathogen Biology, 2005, 18(4): 255-258 |
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| Authors: | WANG Yan AN Gui-zhen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trichinella spiralis muscle larvae ES antigen hybridoma McAb |
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