| 14-3-3γ表达载体的构建及其对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 沈奇,张文文,陶雪娇,段萍,朱雪琼.14-3-3γ表达载体的构建及其对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响[J].温州医科大学学报,2014,44(2):79. |
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| 作者姓名： | 沈奇 张文文 陶雪娇 段萍 朱雪琼 |
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| 作者单位： | 温州医科大学附属第二医院妇产科，浙江温州325027 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（81171926） |
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| 摘 要： | 目的 ：构建一种稳定、高表达的14-3-3γ基因真核表达质粒载体，并探索其抗子宫肌瘤的作用。方法：提取子宫肌瘤细胞总RNA，反转录后通过RT-PCR扩增14-3-3γ，并将扩增的目的基因片段插入pCMV-N-Flag真核表达质粒，构建重组质粒14-3-3γ-pCMV-N-Flag，重组体经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定后，用脂质体转染技术导入子宫肌瘤细胞。应用Western Blot法检测14-3-3γ蛋白的表达，应用CCK-8检测细胞增殖变化，应用Annexin V-FITC/PI双染色法经流式细胞术检测细胞凋亡。结果：①构建的14-3-3γ-pCMV-N-Flag真核表达载体经酶切后电泳和DNA测序，显示载体构建正确；②子宫肌瘤细胞转染重组体后的14-3-3γ表达明显高于转染前（P＜0.05）；③子宫肌瘤细胞转染重组体后，细胞增殖抑制率为52.90%（P＜0.05）；④转染重组体后肌瘤细胞的凋亡率明显高于转染前（P＜0.05）。结论：本研究成功构建14-3-3γ-pCMV-N-Flag真核表达质粒载体，14-3-3γ在子宫肌瘤细胞内高表达后可抑制细胞的增殖和促进细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 子宫肌瘤 载体构建 增殖 凋亡 |
| 收稿时间： | 2013-10-10 |
Construction of a 14-3-3γ expression vector and its effect on proliferation and apoptosis of uterine leiomyoma cells |
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| SHEN Qi,ZHANG Wenwen,TAO Xuejiao,DUAN Ping,ZHU Xueqiong..Construction of a 14-3-3γ expression vector and its effect on proliferation and apoptosis of uterine leiomyoma cells[J].JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL UNIVERSITY,2014,44(2):79. |
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| Authors: | SHEN Qi ZHANG Wenwen TAO Xuejiao DUAN Ping ZHU Xueqiong |
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| Institution: | Department of Obstetrics and Gynecology, the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, Wenzhou, 325027 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | uterine leiomyoma vector construction proliferation apoptosis |
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