| DC靶向适配体修饰的载铜绿假单胞菌DNA疫苗递送系统的构建及体外评价 |
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| 引用本文： | 黄仕琴,石敏,何颖娜,岳瀚勋,余娴.DC靶向适配体修饰的载铜绿假单胞菌DNA疫苗递送系统的构建及体外评价[J].中国药科大学学报,2019,50(6):743-752. |
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| 作者姓名： | 黄仕琴 石敏 何颖娜 岳瀚勋 余娴 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第二医院I期临床试验研究室,重庆医科大学附属第二医院I期临床试验研究室,河北中医学院药学院,重庆医科大学药学院生物化学与分子药理学重点实验室,重庆医科大学附属第二医院I期临床试验研究室 |
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| 基金项目： | 重庆市卫生计生委重点项目资助(No.2016ZDXM010) |
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| 摘 要： | 构建了一种DC靶向适配体修饰的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)DNA疫苗递送系统。采用乙醇注入法制备阳离子脂质体，静电吸附法制备载pVAX1-OprF-VP22的阳离子脂质体(Lip-pOprF-VP22)，探讨不同DOTAP/pDNA质量比的Lip-pOprF-VP22对pVAX1-OprF-VP22的包封效果、对DC2.4的细胞毒性及转染率，筛选最佳质量比的Lip-pOprF-VP22测定其粒径及Zeta电位；后插法制备DC靶向适配体修饰的载pVAX1-OprF-VP22的阳离子脂质体(Apt-Lip-pOprF-VP22)，检测其转染DC2.4后OprF蛋白的表达量及对小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells，BMDCs)成熟的影响。结果表明，Lip-pOprF-VP22随着DOTAP/pDNA质量比增加包封率逐渐增加，当质量比为5∶1时即能很好的包封pVAX1-OprF-VP22；当Lip-pOprF-VP22作用于DC2.4 24 h或48 h后，不同质量比的Lip-pOprF-VP22对DC2.4的存活率均在80%以上；当DOTAP/pDNA质量比由2∶1增加到10∶1，转染率表现为先增加、后降低的趋势，其中DOTAP/pDNA质量比为4∶1、5∶1时转染率相对较高；当DOTAP/pDNA质量比为5∶1时，Lip-pOprF-VP22粒径为(171.67±1.27)nm，Zeta电位为(11.30±0.57)mV；Apt-Lip-pOprF-VP22转染DC2.4后可表达更多OprF蛋白且可明显促进BMDCs的成熟。
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| 关 键 词： | 铜绿假单胞菌 DNA疫苗 DC靶向 适配体 OprF |
Construction and in vitro evaluation of DC-targeted aptamer-modified Pseudomonas aeruginosa DNA vaccine delivery system |
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| HUANG Shiqin,SHI Min,HE Yingn,YUE Hanxun and YU Xian.Construction and in vitro evaluation of DC-targeted aptamer-modified Pseudomonas aeruginosa DNA vaccine delivery system[J].Journal of China Pharmaceutical University,2019,50(6):743-752. |
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| Authors: | HUANG Shiqin SHI Min HE Yingn YUE Hanxun and YU Xian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pseudomonas aeruginosa DNA vaccine DC-targeted aptamer OprF |
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