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人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建
引用本文:张志 黄宗青 沈琪 刘洪涛 邓英太 李爱东 周国强 汪华侨 何蕴韶. 人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建[J]. 中山医科大学学报, 2007, 28(3): 288-291
作者姓名:张志 黄宗青 沈琪 刘洪涛 邓英太 李爱东 周国强 汪华侨 何蕴韶
作者单位:[1]广东医学院附属深圳第四人民医院神经内科,广东深圳518033 [2]中山大学中山医学院人体解剖学教研室脑研究室,广东深圳518033 [3]中山大学达安基因诊断中心,广东广州510080
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2006cb500700)
摘    要:[目的]克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。[方法]采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。[结果]人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。[结论]成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。

关 键 词:苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶 克隆 原核表达质粒
文章编号:1672-3554(2007)03-0288-04
修稿时间:2006-11-02

Cloning of Human Phenylalanine Hydroxylase Gene and Construction of Prokaryotic Expression Plasmid
ZHANG Zhi, HUANG Zong-qing, SHEN Qi, LIU Hong-tao, DENG Ying-tai, LI Ai-dong, ZHOU Guo-qiang, WANG Hua-qiao, HE Yun-shao. Cloning of Human Phenylalanine Hydroxylase Gene and Construction of Prokaryotic Expression Plasmid[J]. Academic Journal of Sun Yat-sen University of Medical Sciences, 2007, 28(3): 288-291
Authors:ZHANG Zhi   HUANG Zong-qing   SHEN Qi   LIU Hong-tao   DENG Ying-tai   LI Ai-dong   ZHOU Guo-qiang   WANG Hua-qiao   HE Yun-shao
Abstract:
Keywords:phenylketonuria   phenylalanine hydroxylase   clone   prokaryotic expression plasmid
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