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稳定表达CD200的U937细胞株的建立
引用本文:郝兵,高嵩,侯治富. 稳定表达CD200的U937细胞株的建立[J]. 中国免疫学杂志, 2007, 23(11): 1019-1021,1025
作者姓名:郝兵  高嵩  侯治富
作者单位:1. 浙江大学第一附属医院卫生部多器官联合移植重点实验室,杭州,310003
2. 浙江大学医学院附属第二医院检验科,杭州,310009
3. 吉林大学中日联谊医院中心实验室,长春,130033
摘    要:
目的:构建稳定表达CD200蛋白的人单核细胞系U937细胞株,为研究该基因的作用机制奠定基础。方法:用电转染基因法将含有人CD200 cDNA的真核表达载体pcDNA3-CD200质粒和pcDNA3质粒分别转入人单核细胞系U937细胞中,经G418筛选,转染阳性细胞连续传代培养,并应用RT-PCR及流式细胞术检测CD200 mRNA和蛋白表达情况。结果:经G418筛选,U937细胞全部死亡,转染pcDNA3质粒和pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞存活,并可连续传代培养30代;转染pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞RT-PCR检测有一特异性扩增带;流式细胞术检测CD200表达结果显示:转染pcD-NA3-CD200重组质粒的U937细胞CD200表达阳性细胞率(77.20%)显著高于转染pcDNA3质粒(3.20%)和U937细胞组(2.10%)(F=133996.40,P〈0.01);各代间差异无显著性(F=1.03,P〉0.05)。结论:用基因转染法成功地建立了稳定表达CD200蛋白的人单核细胞株U937-pcDNA3-CD200。

关 键 词:U937细胞  电转染  流式细胞术
文章编号:1000-484X(2007)11-1019-04
修稿时间:2006-12-092007-03-09

Establishment of CD200 stably-expressed U937 cell line
HAO Bing,GAO Song,HOU Zhi-Fu. Establishment of CD200 stably-expressed U937 cell line[J]. Chinese Journal of Immunology, 2007, 23(11): 1019-1021,1025
Authors:HAO Bing  GAO Song  HOU Zhi-Fu
Affiliation:Department of Clinical Laboratory,Second Affiliated Hospital , Zhejiang University College of Medicine, Hangzhou 310003, China
Abstract:
Keywords:CD200
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