| 人STIM1基因真核表达载体的构建及其在肝细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 张振亚,张宗明,潘丽洁. 人STIM1基因真核表达载体的构建及其在肝细胞中的表达[J]. 世界华人消化杂志, 2009, 17(15) |
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| 作者姓名： | 张振亚 张宗明 潘丽洁 |
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| 作者单位： | 清华大学医学院清华大学第一附属医院消化中心普外科,北京市,100016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,清华-裕元医学科学研究基金 |
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| 摘 要： | 目的: 构建人STIM1基因真核表达载体, 并观察其在人肝细胞株(HL-7702)中的表达.方法: 提取HL-7702细胞总RNA, RT-PCR扩增,经纯化回收后将片段克隆至pGM-T载体, 酶切琼脂糖凝胶电泳分析鉴定并测序, 最后用重组质粒转染HL-7702细胞, 通过PCR-电泳和Western blot法检测STIM1基因的表达.结果: PCR扩增的片段长度为342 bp, 测序结果以及重组质粒pGM-T-STIM1的酶切琼脂糖凝胶电泳鉴定结果均证明STIM1基因成功克隆到真核表达载体中. PCR-电泳和Westernb l o t实验结果分别显示转染重组质粒后的HL-7702细胞在基因与蛋白水平表达STIM1均有所增强.结论: 成功构建了人STIM1基因的真核表达载体pGM-T-STIM1, 并在人肝细胞株HL-7702中稳定表达, 为研究STIM1蛋白在人肝细胞内Ca2+浓度调控方面及其对人肝细胞分泌功能的影响奠定了良好的实验基础.
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| 关 键 词： | 真核表达载体 人肝细胞株HL-7702 基因表达进行验证 |
Construction of human STIM1 eukaryotic expression vector and its expression in HL-7702 cells |
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| ZhenYa Zhang,ZongMing Zhang,LiJie Pan. Construction of human STIM1 eukaryotic expression vector and its expression in HL-7702 cells[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2009, 17(15) |
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| Authors: | ZhenYa Zhang ZongMing Zhang LiJie Pan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | STIM1 |
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