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TDI-FP法检测肿瘤患者ERCC1 Asn118Asn基因多态性
引用本文:张菊,李丁,李小惠,张贺龙,郭宴海,颜真,刘文超. TDI-FP法检测肿瘤患者ERCC1 Asn118Asn基因多态性[J]. 临床检验杂志, 2010, 28(3): 197-199
作者姓名:张菊  李丁  李小惠  张贺龙  郭宴海  颜真  刘文超
作者单位:第四军医大学药学系全军基因诊断技术研究所;第四军医大学唐都医院肿瘤科;第四军医大学西京医院肿瘤科;
基金项目:国家高技术研究和发展计划(2008AA02Z444)
摘    要:
目的建立一种可靠、敏感、全面的ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测新方法,用于预测肿瘤患者对铂类的耐药性。方法以ERCC1基因第4个外显子Asn118Asn的一对引物行PCR扩增227例临床样本DNA,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应(TD I-FP)结合,应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测,并以DNA序列测定验证检测结果。结果227例临床样本DNA中,119例(52.4%)ERCC1 Asn118Asn基因为C/C纯合子(AAC)基因型,88例(38.8%)为C/T杂合子基因型,20例(8.8%)为T/T纯合子(AAT)基因型。但DNA序列测定法检出杂合子基因型仅33例。结论本研究初步建立了特异性较好、操作简便、无需标记探针的临床标本ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测新方法,有望用于肿瘤患者铂类耐药性的检测。

关 键 词:切除修复交叉互补基因1(ERCC1)  基因多态性  模板指导  荧光偏振检测  
收稿时间:2009-07-21
修稿时间:2009-10-24

Detection of the polymorphism of ERCC1 Asn118Asn by TDI-FP assay
ZHANG Ju,LI Ding,LI Xiao-hui,ZHANG He-long,GUO Yan-hai,YAN Zhen,LIU Wen-chao. Detection of the polymorphism of ERCC1 Asn118Asn by TDI-FP assay[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2010, 28(3): 197-199
Authors:ZHANG Ju  LI Ding  LI Xiao-hui  ZHANG He-long  GUO Yan-hai  YAN Zhen  LIU Wen-chao
Affiliation:ZHANG Ju1,LI Ding1,LI Xiao-hui2,ZHANG He-long2,GUO Yan-hai1,YAN Zhen1,LIU Wen-chao3
Abstract:
Objective To develop a simple and accurate method for detecting polymorphism of the excision repair cross-complementing group 1(ERCC1) Asn118Asn by template direct dye-terminator incorporation with fluorescence-polarization(TDI-FP) assay.Methods The primers of ERCC1 exon 4 were used to amplify DNA of 227 samples and the PCR products were detected by TDI-FP.A fluorescence labeled ddNTP was directly added to the probe under the direction of template,the specific PCR products.The results were measured by a flu...
Keywords:ERCC1  polymorphism  template direct  fluorescence polarization  
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