牙龈卟啉单胞菌对血管平滑肌细胞钙化作用的研究

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis, P. gingivalis)对小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)钙化的影响。方法:选取C57BL/6小鼠,取主动脉体外培养VSMC,通过细胞免疫荧光染色,用α-smooth muscle actin(α-SMA)特异性抗体对VSMC鉴定。热灭活P. gingivalis以不同的感染倍数(multiplicity of infection,MOI)干预VSMC,分别在12、24、48、72 h检查VSMC的细胞活性,在21 天时检测VSMC钙化表现及钙含量。并且将P. gingivalis与小鼠主动脉共培养,观察P. gingivalis对小鼠主动脉的钙化作用。结果:特异性抗体α-SMA在细胞中荧光染色阳性,证明体外培养为VSMC。P. gingivalis(MOI:10,100)刺激VSMC在24和48 h,细胞活性明显增强,在72 h,所有感染倍数下(MOI:1,10,100 )细胞活性较对照组均明显增强(P<0.05)。培养至21 d时,P. gingivalis诱导VSMC出现明显钙化,钙含量与MOI成正相关(P<0.05)。P. gingivalis与小鼠主动脉培养14 d,见主动脉壁出现明显钙化沉积。结论:P. gingivalis可诱导VSMC细胞活性增强及钙化,并且可直接引起主动脉壁钙化沉积。