| 携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导培养关节软骨细胞 |
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| 引用本文： | 江海良,夏青,魏振,黄爽,贾静. 携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导培养关节软骨细胞[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008, 12(24): 4611-4614 |
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| 作者姓名： | 江海良 夏青 魏振 黄爽 贾静 |
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| 作者单位： | 山东枣庄矿业集团有限责任公司中心医院骨外科,山东省枣庄市,277011 |
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| 摘 要： | 目的:胰岛素样生长因子Ⅰ通常被认为是软骨生长和稳定中最关键的生长因子之一,可以促进软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖.应用携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒(Adenovirus-human insulin like growth factor-Ⅰ transgene construct,Ad-hIGF-Ⅰ)体外转导培养关节软骨细胞,探讨其在体外促进软骨细胞外基质成分生成的能力.方法:实验于2005-01/2007-04在大连医科大学附属四院骨科实验室完成.分离培养3周龄兔膝关节及股骨头软骨细胞,将受测细胞随机分为转导组与未转导组,以500感染复数的Ad-hlGF-I转导第1代软骨细胞,转导组中的第1,3,5,7代细胞分别为转导后48 h,3周,7周和9周的软骨细胞.采用样本碱水解法、阿利新蓝法和酶联免疫吸附方法检测转导组和未转导组的第1,3,5,7代细胞羟脯氨酸、糖胺多糖、胰岛素样生长因子I蛋白浓度.结果:①倒置显微镜观察,转导组兔关节软骨细胞生长增殖稳定,至第7代仍旧以三角形、梭形及纺锤形细胞为主,偶见长梭形和树根形细胞,且轮廓清晰,透亮度大,折光性强;而末转导组细胞培养至第4代时即己出现长梭形细胞,自第5代细胞形态几乎全部变成长梭形.②随着培养时间延长和传代次数增加,软骨细胞上清液中胰岛素样生长因子I蛋白、羟脯氨酸和糖胺多糖浓度的逐渐降低,转导组软骨细胞均高于同代未转导组细胞(P<0.05).结论:携带人胰岛素样生长因子I基因的重组腺病毒体外转导的关节软骨细胞,可以稳定产生内源性的胰岛素样生长因子I,并进而促进软骨细胞分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖.
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| 关 键 词： | 胰岛素样生长因子Ⅰ 转导 细胞培养 软骨细胞 软骨组织工程 人胰岛素 样生长因子 基因 重组 病毒 体外转导 培养时间 关节软骨 软骨细胞 growth like insulin transduction articular chondrocytes Culture in vitro 细胞分泌 内源性 糖胺多糖浓度 蛋白浓度 |
Culture of articular chondrocytes through transduction of adenovirus-human insulin like growth factor-Ⅰ transgene in vitro |
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| Jiang Hai-liang,Xia Qing,Wei Zhen,Huang Shuang,Jia Jing. Culture of articular chondrocytes through transduction of adenovirus-human insulin like growth factor-Ⅰ transgene in vitro[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2008, 12(24): 4611-4614 |
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| Authors: | Jiang Hai-liang Xia Qing Wei Zhen Huang Shuang Jia Jing |
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