| 20S蛋白酶体β5亚单位基因沉默对人骨髓间充质干细胞增殖能力的影响 |
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| 引用本文： | 张伟,刘雪芹,苗苗,宋慧芳,杨桂姣,陆利.20S蛋白酶体β5亚单位基因沉默对人骨髓间充质干细胞增殖能力的影响[J].解剖学杂志,2015,38(2). |
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| 作者姓名： | 张伟 刘雪芹 苗苗 宋慧芳 杨桂姣 陆利 |
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| 作者单位： | 1. 山西医科大学人体解剖学教研室,太原,030001
2. 山西医科大学第二临床医学院,太原,030001 |
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| 摘 要： | 目的:应用基因沉默技术,观察下调20S蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖能力的影响及其潜在机制,寻求调节干细胞活力的关键靶点。方法:构建PSMB5-shRNA慢病毒载体感染早期hBMSCs,根据感染条件不同将细胞分为绿色荧光蛋白(GFP)对照组和shRNA组。倒置荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR和免疫印迹检测PSMB5沉默效率,荧光分光光度法检测蛋白酶体活性;BrdU掺入实验观察PSMB5基因沉默对早期hBMSCs增殖潜能的影响,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫印迹检测细胞周期相关蛋白1(cyclin D1)及其激酶CDK4的表达变化。结果:慢病毒感染早期hBMSCs 72 h可见约95%以上细胞表达绿色荧光蛋白。shRNA组PSMB5 mRNA和蛋白表达水平较GFP对照组分别降低93.31%±0.59%和56.83%±13.31%,且蛋白酶体活性较对照组降低37.47%±0.41%。此外,shRNA组BrdU阳性率26.14%±8.13%较对照组49.53%±11.18%显著降低,G1期细胞较GFP对照组增多,而S期和G2/M期细胞却较对照组减少,Cyclin D1和CDK4的表达水平分别下降54.55%±7.76%和63.26%±15.76%。结论:PSMB5基因沉默能够下调Cyclin D1和CDK4的表达,导致细胞G1/S转换停滞,影响hBMSCs增殖潜能。
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| 关 键 词： | 人骨髓间充质干细胞 20S蛋白酶体β5亚单位 基因沉默 增殖 |
Effect of PSMB5-shRNA on proliferation of human bone marrow stromal stem cells |
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| Zhang Wei,Liu Xueqin,Miao Miao,Song Huifang,Yang Guijiao,Lu Li.Effect of PSMB5-shRNA on proliferation of human bone marrow stromal stem cells[J].Chinese Journal of Anatomy,2015,38(2). |
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| Authors: | Zhang Wei Liu Xueqin Miao Miao Song Huifang Yang Guijiao Lu Li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human bone marrow stromal stem cells proteasome subunit beta type-5 knockdown proliferation |
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