| 中药穿山甲的DNA分子鉴定研究 |
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| 引用本文： | 尹艳,刘逊,王兵,高琳惠,张夏楠.中药穿山甲的DNA分子鉴定研究[J].中国中药杂志,2017,42(11):2078-2084. |
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| 作者姓名： | 尹艳 刘逊 王兵 高琳惠 张夏楠 |
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| 作者单位： | 首都医科大学 中医药学院, 北京 100069,苏州卫生职业技术学院, 江苏 苏州 215009,山西中医学院, 山西 太原 030024,首都医科大学 中医药学院, 北京 100069,首都医科大学 中医药学院, 北京 100069 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81473168） |
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| 摘 要： | 对中药穿山甲及其混伪品进行分子鉴定研究,建立一个稳定、准确的位点特异性PCR鉴别体系。收集整理穿山甲属动物组织样本及NCBI序列,提取基因组总DNA,PCR扩增Cytb和COⅠ序列并测序,通过Bio Edit软件进行序列比对,应用MEGA 6.0构建序列系统聚类树,并根据序列特异位点设计和筛选中华穿山甲特异性鉴别引物,并对PCR反应条件进行退火温度、DNA模板上样量和PCR循环数等条件的适应性考查。结果表明:Cytb和COⅠ序列均能有效对穿山甲正、伪品进行聚类分析;在位点特异性PCR反应体系中,当退火温度为55~60℃,DNA模板量3~100 ng,PCR扩增35个循环时,基于COⅠ序列的引物COⅠ-S10/A5能使中华穿山甲扩增出约400 bp的特异性条带,而其他穿山甲品种扩增结果为阴性。该文基于COⅠ序列的引物COⅠ-S10/A5能实现中华穿山甲与伪品印度穿山甲、马来穿山甲、树穿山甲等的准确、稳定鉴别。
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| 关 键 词： | 穿山甲 COⅠ Cytb 分子鉴定 |
| 收稿时间： | 2016/12/12 0:00:00 |
DNA molecular identification of Manis pentadactyla |
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| YIN Yan,LIU Xun,WANG Bing,GAO Lin-hui and ZHANG Xia-nan.DNA molecular identification of Manis pentadactyla[J].China Journal of Chinese Materia Medica,2017,42(11):2078-2084. |
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| Authors: | YIN Yan LIU Xun WANG Bing GAO Lin-hui and ZHANG Xia-nan |
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| Institution: | School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China,Suzhou Vocational Health College, Suzhou 215009, China,Shanxi University of Traditional Chinese Medicine, Taiyuan 030024, China,School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China and School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China |
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| Abstract: | |
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