血清灭活对小鼠淋巴瘤试验结果的影响

目的 探索小鼠淋巴瘤胸腺激酶（tk）位点基因突变试验中血清灭活对结果的影响。方法 取对数生长期的小鼠淋巴瘤细胞（L5178Y3.7.2c-tk^+/-）设立阴性对照组和阳性对照组，阴性对照组加入100 μL DMSO，阳性对照组加入100 μL 10 μg/mL 4-硝基喹啉（4-NQO）诱导突变，测定细胞悬浮增长率（SG）、相对悬浮增长率（RSG）、平板效率（PE）、相对存活率（RS）和相对总生长率（RTG）等指标。根据血清灭活与否和选择突变剂三氟胸苷（TFT）的含量，在筛选突变集落过程中，将阴性对照组和阳性对照组各分为：灭活组、未灭活+1.5倍TFT组、未灭活组，测定突变频率（MF），对试验结果进行评价。结果 阴性对照组SG在8~32，细胞倍增速度符合试验要求；PE在65%~120%，符合试验成立条件。阳性对照的灭活组、未灭活+1.5倍TFT组、未灭活组中MF均比阴性对照组至少增加300×10^-6且小克隆突变频率至少占40%，符合试验要求。阴性对照灭活组的MF数值在标准范围内，未灭活组的MF数值明显高于灭活组，超过标准数值范围，且96孔板中的大小克隆不易区分；阴性对照未灭活+1.5倍TFT组使得MF数值在标准范围内，但远高于灭活组。结论 在小鼠淋巴瘤试验中，测定MF的平板一定要用灭活的血清，未灭活血清可能通过抵消TFT作用对结果产生很大影响。

Effect of inactivated serum on mouse lymphoma test