| 人骨唾液蛋白非融合荧光蛋白载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 杜红延,王捷,郭勇,郑霖,杨静. 人骨唾液蛋白非融合荧光蛋白载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达[J]. 中国临床康复, 2005, 9(38): 152-154,i0005 |
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| 作者姓名： | 杜红延 王捷 郭勇 郑霖 杨静 |
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| 作者单位： | [1]华南理工大学生物科学与工程学院,广东省广州市510640 [2]解放军广州军区广州总医院医学实验中心,广东省广州市510010 |
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| 基金项目： | 广东省医学科研基金资助项目（A2002536）;广东省自然科学基金资助项目（04003534） |
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| 摘 要： | 背景：人骨唾液蛋白基因在矿化组织以外的易发生骨转移的人乳腺癌中表达。临床观察显示骨转移处的乳腺癌细胞骨唾液蛋白的表达量要高于原发部位的乳腺癌细胞，因此骨唾液蛋白有可能与肿瘤特异性骨转移的关系密切。研究乳腺癌骨转移可为将来临床的预防和治疗提供新的药物靶点。目的：建立骨唾液蛋白的稳定表达乳腺癌细胞系，观察骨唾液蛋白在乳腺癌骨转移的整个过程中的作用。设计：对照实验。单位：华南理工大学生物科学与工程学院，解放军广州军区广州总医院医学实验中心。材料：实验于2003-11／2004-03在解放军广州军区广州总医院医学实验室完成。质粒、菌种和细胞：pIRES2-EGFP载体质粒，E．Coli．Top10、含有人骨唾液蛋白基因全长的克隆载体pB-hBSP和发生特异性骨转移以及脑转移的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO和MDA-MB-23lBR。方法：将人骨唾液蛋白基因通过聚合酶链式反应的方法从构建好的pB-hBSP载体中亚克隆出来，在其5’和3’端分别引入BglⅡ和PsiⅠ限制性酶切位点，定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP，构建重组载体pIRES2-hBSP-EGFP。利用脂质体转染的方法将构建好的重组质粒转入特异性脑转移和骨转移的乳腺癌细胞株MDA-MB-231BR和MDA-MB-231BO中。主要观察指标：pIRES2-hBSP-EGFP重组表达载体的构建。重组表达载体pIRES2-hBSP-EGFP转染乳腺癌细胞。结果：①成功构建人骨唾液蛋白和绿色荧光蛋白非融合表达的真核表达载体pIRES2-hBSP-EGFP。②成功转染特异骨转移和脑转移的乳腺癌细胞株，可在荧光显微镜下观察到荧光蛋白标记，人骨唾液蛋白得到相应表达。结论：真核表达载体pIRES2-hBSP-EGFP的构建及转染可为骨唾液蛋白在乳腺癌骨转移中的作用的体内、外研究奠定一定的基础。
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| 关 键 词： | 唾液蛋白质类 乳腺肿瘤 转染 |
| 文章编号： | 1671-5926（2005）38-0152-03 |
| 收稿时间： | 2005-03-09 |
| 修稿时间： | 2005-03-092005-04-10 |
Construction of plRES2-HBSP-EGFP vector and its expression in breast cancer cells |
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| Du Hong-yan, Wang Jie, Guo Yong, Zheng lin, Yang Jing. Construction of plRES2-HBSP-EGFP vector and its expression in breast cancer cells[J]. Chinese Journal of Clinical Rehabilitation, 2005, 9(38): 152-154,i0005 |
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| Authors: | Du Hong-yan Wang Jie Guo Yong Zheng lin Yang Jing |
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| Affiliation: | 1 College of Biological Sciences and Engineering, South China University of Science and Technology, Guangzhou 510640, Guangdong Province, China; 2 Center of Medical Research, Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command, Guangzhou 510010, Guangdong Province, China |
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