| 人LDLR基因的克隆及在Hepa1-6细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 吕丽萍,贾帅争,王海平,詹林盛,王全立. 人LDLR基因的克隆及在Hepa1-6细胞中的表达[J]. 军事医学科学院院刊, 2004, 28(3): 212-214 |
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| 作者姓名： | 吕丽萍 贾帅争 王海平 詹林盛 王全立 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 3 0 0 184) |
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| 摘 要： | 目的 :从能感染HCV的人肝癌细胞HepG2中克隆出人LDLR基因 ,构建其真核表达质粒 ,并在小鼠肝癌细胞Hepa1 6中进行表达。方法 :从HepG2中提取总RNA ,采取逆转录PCR(RT PCR)方法得到人LDLR的cDNA。将获得的人LDLR基因克隆到真核表达载体pcDNA3中 ,进行酶切和序列鉴定。将重组质粒pcDNA3 hLDLR和空载体转入Hepa1 6 ,G4 18筛选 ,并用RT PCR和FACS检测人LDLR基因转录和蛋白的表达。结果 :人LDLR的cDNA已插入载体pcDNA3构建成真核表达质粒pcDNA3 hLDLR ,双酶切和测序表明 ,克隆的人LDLR与已登录GenBank的序列存在核苷酸多态性 ,但编码的氨基酸序列完全一致 ,该序列的GenBank登录号为gi|2 16 2 96 4 7|gb|AY114 15 5 .1,并且真核表达质粒的构建正确。用脂质体介导的方法转入Hepa1 6后 ,用RT PCR和FACS检测表明 ,细胞可表达人LDLR。结论 :成功地构建了真核表达质粒pcDNA3 hLDLR ,为进一步研究HCV和人LDLR的相互作用 ,以及建立可能的HCV细胞感染模型奠定了基础。
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| 关 键 词： | 低密度脂蛋白受体(LDLR) 克隆 基因表达 Hepa1-6细胞 质粒 |
| 文章编号： | 1000-5501(2004)03-0212-03 |
| 修稿时间： | 2003-11-10 |
Cloning of human low density lipoprotein receptor gene and its expression in Hepa1-6 cells |
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| L Li-Ping,JIA Shuai-Zheng,WANG Hai-Ping,ZHAN Lin-Sheng,WANG Quan-Li. Cloning of human low density lipoprotein receptor gene and its expression in Hepa1-6 cells[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2004, 28(3): 212-214 |
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| Authors: | L Li-Ping JIA Shuai-Zheng WANG Hai-Ping ZHAN Lin-Sheng WANG Quan-Li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | low density lipoprotein receptor(LDLR) cloning gene expression Hepa1-6 cell plasmids |
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